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1、微生物細(xì)胞大小和數(shù)微生物細(xì)胞大小和數(shù)量的測(cè)定量的測(cè)定 微生物細(xì)胞大小和數(shù)量的測(cè)定微生物細(xì)胞大小和數(shù)量的測(cè)定 目的要求 實(shí)驗(yàn)材料 實(shí)驗(yàn)程序 思考題目的要求目的要求 學(xué)習(xí)使用目鏡測(cè)微尺和鏡臺(tái)測(cè)微尺在顯學(xué)習(xí)使用目鏡測(cè)微尺和鏡臺(tái)測(cè)微尺在顯微鏡下測(cè)定微生物大小的方法。微鏡下測(cè)定微生物大小的方法。學(xué)習(xí)使用血球記數(shù)板測(cè)定微生物數(shù)量的學(xué)習(xí)使用血球記數(shù)板測(cè)定微生物數(shù)量的方法。方法。實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)材料 顯微鏡、目鏡測(cè)微尺、鏡臺(tái)測(cè)微尺、細(xì)顯微鏡、目鏡測(cè)微尺、鏡臺(tái)測(cè)微尺、細(xì)菌染色片、血球記數(shù)板、酵母菌懸液、菌染色片、血球記數(shù)板、酵母菌懸液、蓋玻片、無菌滴管、西水紙、擦鏡紙、蓋玻片、無菌滴管、西水紙、擦鏡紙、香柏油、二甲

2、苯。香柏油、二甲苯。實(shí)驗(yàn)程序?qū)嶒?yàn)程序 測(cè)定微生物的大小測(cè)定微生物的大小 測(cè)定微生物數(shù)量測(cè)定微生物數(shù)量實(shí)驗(yàn)程序?qū)嶒?yàn)程序（測(cè)定微生物的大?。y(cè)定微生物的大?。y(cè)定的工具：目鏡測(cè)微尺測(cè)定的工具：目鏡測(cè)微尺 鏡臺(tái)測(cè)微尺鏡臺(tái)測(cè)微尺實(shí)驗(yàn)程序?qū)嶒?yàn)程序 （測(cè)定微生物的大?。y(cè)定微生物的大?。┠跨R測(cè)微尺的校正：在高倍鏡下，看清鏡臺(tái)測(cè)微尺的刻度后，目鏡測(cè)微尺的校正：在高倍鏡下，看清鏡臺(tái)測(cè)微尺的刻度后，轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡，使目鏡測(cè)微尺與鏡臺(tái)測(cè)微尺的刻度平行，移動(dòng)推動(dòng)轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡，使目鏡測(cè)微尺與鏡臺(tái)測(cè)微尺的刻度平行，移動(dòng)推動(dòng)器，使目鏡測(cè)微尺的器，使目鏡測(cè)微尺的0點(diǎn)與鏡臺(tái)測(cè)微尺的某一刻度重合，然后，點(diǎn)與鏡臺(tái)測(cè)微尺的某一刻度重合，

3、然后，仔細(xì)尋找兩尺第二個(gè)完全重合的刻度。計(jì)算兩刻度間目鏡測(cè)微仔細(xì)尋找兩尺第二個(gè)完全重合的刻度。計(jì)算兩刻度間目鏡測(cè)微尺的格數(shù)和鏡臺(tái)測(cè)微尺的格數(shù)。由于鏡臺(tái)測(cè)微尺的刻度每格長(zhǎng)尺的格數(shù)和鏡臺(tái)測(cè)微尺的格數(shù)。由于鏡臺(tái)測(cè)微尺的刻度每格長(zhǎng)10m，所以可得：所以可得：目鏡測(cè)微尺每格長(zhǎng)度（目鏡測(cè)微尺每格長(zhǎng)度（m）=（鏡臺(tái)測(cè)微尺格數(shù)鏡臺(tái)測(cè)微尺格數(shù)10）/目鏡目鏡測(cè)微尺格數(shù)測(cè)微尺格數(shù) 注意：校正目鏡測(cè)微尺必須針對(duì)特定的顯微鏡和附件（特定的注意：校正目鏡測(cè)微尺必須針對(duì)特定的顯微鏡和附件（特定的接物鏡、接目鏡、鏡筒長(zhǎng)度等）進(jìn)行，而且只能在這特定的情接物鏡、接目鏡、鏡筒長(zhǎng)度等）進(jìn)行，而且只能在這特定的情況下才可重復(fù)使用。況

4、下才可重復(fù)使用。菌體大小的測(cè)定：取下鏡臺(tái)測(cè)微尺，將細(xì)菌染色標(biāo)本置于載物菌體大小的測(cè)定：取下鏡臺(tái)測(cè)微尺，將細(xì)菌染色標(biāo)本置于載物臺(tái)上，然后在油鏡下用目鏡測(cè)微尺測(cè)量菌體的長(zhǎng)和寬。臺(tái)上，然后在油鏡下用目鏡測(cè)微尺測(cè)量菌體的長(zhǎng)和寬。實(shí)驗(yàn)程序?qū)嶒?yàn)程序 （測(cè)定微生物數(shù)量）（測(cè)定微生物數(shù)量）方法：活菌計(jì)數(shù)法方法：活菌計(jì)數(shù)法平板菌落計(jì)數(shù)法；總菌計(jì)數(shù)法平板菌落計(jì)數(shù)法；總菌計(jì)數(shù)法血血球計(jì)數(shù)板或霍瑟（球計(jì)數(shù)板或霍瑟（Peroff Hausser）細(xì)菌計(jì)數(shù)板（二者原理細(xì)菌計(jì)數(shù)板（二者原理和部件相同，只是厚薄不同而已）。和部件相同，只是厚薄不同而已）。實(shí)驗(yàn)程序?qū)嶒?yàn)程序 1 （測(cè)定微生物數(shù)量）（測(cè)定微生物數(shù)量）本實(shí)驗(yàn)用血球計(jì)

5、數(shù)板計(jì)數(shù)酵母菌的數(shù)量本實(shí)驗(yàn)用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)酵母菌的數(shù)量 1.1.取清潔無油的血球計(jì)數(shù)板，在計(jì)數(shù)室上面加取清潔無油的血球計(jì)數(shù)板，在計(jì)數(shù)室上面加蓋玻片。蓋玻片。2.2.取酵母菌液，搖勻，用滴管由蓋玻片邊緣滴一取酵母菌液，搖勻，用滴管由蓋玻片邊緣滴一小滴，使菌液自行滲入，計(jì)數(shù)室內(nèi)不得有氣泡。小滴，使菌液自行滲入，計(jì)數(shù)室內(nèi)不得有氣泡。3.3.靜止靜止5min后，用低倍鏡觀察并將計(jì)數(shù)室移至后，用低倍鏡觀察并將計(jì)數(shù)室移至視野中央。視野中央。4.4.在高倍鏡下計(jì)數(shù)：隨機(jī)計(jì)數(shù)五個(gè)中格的平均在高倍鏡下計(jì)數(shù)：隨機(jī)計(jì)數(shù)五個(gè)中格的平均值，然后求得每個(gè)中格的平均值。乘上值，然后求得每個(gè)中格的平均值。乘上16（或（或25

6、）就得出一大格中的總菌數(shù)，最后再換算到每就得出一大格中的總菌數(shù)，最后再換算到每mL菌液中的含菌數(shù)。菌液中的含菌數(shù)。實(shí)實(shí) 驗(yàn)驗(yàn) 程程 序序IV 2 5.5.計(jì)算方法計(jì)算方法：6.6.注意事項(xiàng)：壓在方格線上的菌體，以壓在底線和右注意事項(xiàng)：壓在方格線上的菌體，以壓在底線和右側(cè)線上的菌體計(jì)入本格內(nèi)；遇到有芽體的酵母時(shí)，側(cè)線上的菌體計(jì)入本格內(nèi)；遇到有芽體的酵母時(shí)，若芽體和母體同等大，就按單個(gè)酵母計(jì)數(shù)。若芽體和母體同等大，就按單個(gè)酵母計(jì)數(shù)。7.7.計(jì)數(shù)完畢后，血球計(jì)數(shù)板要立即清洗干凈，并用計(jì)數(shù)完畢后，血球計(jì)數(shù)板要立即清洗干凈，并用吸水紙吸干，最后用擦鏡紙擦干凈，并放回盒內(nèi)。吸水紙吸干，最后用擦鏡紙擦干凈，

7、并放回盒內(nèi)。（X1+X2+X3+X4+X5）5X 25（或或16）X 10 X 1000 x 稀釋倍數(shù)稀釋倍數(shù) 酵母菌細(xì)胞數(shù)酵母菌細(xì)胞數(shù)/mL=思考題思考題 為什么目鏡測(cè)微尺必須用鏡臺(tái)測(cè)微尺來為什么目鏡測(cè)微尺必須用鏡臺(tái)測(cè)微尺來校正？校正？在顯微鏡下直接測(cè)定微生物數(shù)量有什么在顯微鏡下直接測(cè)定微生物數(shù)量有什么優(yōu)缺點(diǎn)？?jī)?yōu)缺點(diǎn)？實(shí)實(shí) 驗(yàn)驗(yàn) 五五結(jié)結(jié) 束束謝謝觀看/歡迎下載BY FAITH I MEAN A VISION OF GOOD ONE CHERISHES AND THE ENTHUSIASM THAT PUSHES ONE TO SEEK ITS FULFILLMENT REGARDLESS OF OBSTACLES.BY FAITH I BY FAITH