《串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)在新生兒篩查上的應(yīng)用課件.ppt》由會(huì)員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)在新生兒篩查上的應(yīng)用課件.ppt（22頁(yè)珍藏版）》請(qǐng)?jiān)趨R文網(wǎng)上搜索。

1、串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)在新生兒篩查方面的應(yīng)用在新生兒篩查方面的應(yīng)用新生兒篩查的必要性新生兒篩查的必要性?遺傳代謝病多是罕見病，種類繁多，約4000 種，常見的500 種以上，單一病種發(fā)病率低,總體發(fā)病率1/3000-5000?新生兒篩查：及早治療可預(yù)防疾病的發(fā)作，減輕癥狀提高患兒生存質(zhì)量，減少傷殘?產(chǎn)前診斷：預(yù)防殘疾兒童的出生，提高出生人口素質(zhì)?臨床篩查及診斷：明確診斷，減輕癥狀，挽救生命，減少醫(yī)療糾紛串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)的優(yōu)勢(shì)串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)的優(yōu)勢(shì)特異性特異性：檢測(cè)分子量，內(nèi)標(biāo)定量顯著降低假陽(yáng)性率敏感性敏感性：明顯降低假陰性率高通量高通量：一次可以檢測(cè)幾十種小分子物質(zhì)（30-50 多種疾?。慌_(tái)儀器

2、每天檢測(cè) 500 600 個(gè)樣品，每個(gè)標(biāo)本2-3分鐘采血簡(jiǎn)單，可以寄送串聯(lián)質(zhì)譜能篩查哪些疾病?氨基酸氨基酸障礙疾病??；鈮A有機(jī)酸及脂肪酸代謝障礙疾病?溶酶體病及腦白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)不良?SCID（重癥聯(lián)合免疫缺陷）比較成熟?臨床應(yīng)用范圍不斷擴(kuò)大?半乳糖血癥、糖原累積癥、半乳糖血癥、糖原累積癥、Wilson病及病及線粒體腦肌病等等不能篩查線粒體腦肌病等等不能篩查測(cè)定方法測(cè)定方法?目前使用目前使用 LCMSMS 技技術(shù)術(shù)主要主要檢測(cè)檢測(cè)的的氨基酸氨基酸及及酰?；鈮A肉堿，可分，可分別別作作為為氨基酸代氨基酸代謝謝異常異常、脂肪酸代脂肪酸代謝謝異常異常和和有機(jī)酸代有機(jī)酸代謝謝異常異常等疾病的判斷指征等疾病

3、的判斷指征檢測(cè)目標(biāo)氨基酸酰基肉堿對(duì)應(yīng)代謝疾病類型氨基酸代謝異常脂肪酸代謝異常有機(jī)酸代謝異常?前前處處理方法理方法?一般 LCMSMS 新生兒篩查血片的前處理方法可根據(jù)是否進(jìn)行衍生化反應(yīng)分為衍生化法和非衍生化法兩大類，兩種前處理方法在各實(shí)驗(yàn)室或檢測(cè)機(jī)構(gòu)均有使用，具體操作細(xì)節(jié)可能有所不同，其大致流程如下衍生化法衍生化法原材料采購(gòu)與初加工部門原材料采購(gòu)與初加工部門23非衍生化法非衍生化法生產(chǎn)產(chǎn)品的車間生產(chǎn)產(chǎn)品的車間衍生化法比較精確，但步驟繁瑣，且目標(biāo)化合物易分解；非衍生化法步驟簡(jiǎn)單，成本低，適合檢測(cè)大量樣本，但不夠精確。4動(dòng)力供應(yīng)部門動(dòng)力供應(yīng)部門液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜的檢測(cè)原理液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜的檢測(cè)原理?

4、新生兒串新生兒串聯(lián)質(zhì)譜篩查聯(lián)質(zhì)譜篩查使用使用四極桿四極桿質(zhì)譜質(zhì)譜，該該類類串串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)質(zhì)譜由由四極桿四極桿質(zhì)質(zhì)量分析器量分析器、碰撞室碰撞室、四極桿四極桿質(zhì)質(zhì)量分析器量分析器組組成。待成。待測(cè)測(cè)化合物離化合物離子化后子化后產(chǎn)產(chǎn)生相生相應(yīng)應(yīng)前體離子，前體離子前體離子，前體離子經(jīng)經(jīng)碰碰撞室撞室發(fā)發(fā)生生誘導(dǎo)誘導(dǎo)碰撞解離碰撞解離產(chǎn)產(chǎn)生生產(chǎn)產(chǎn)物離子碎片物離子碎片，導(dǎo)導(dǎo)入入檢測(cè)檢測(cè)器器產(chǎn)產(chǎn)生生強(qiáng)強(qiáng)度信號(hào)。度信號(hào)。LC-MS/MS檢測(cè)到的離子流圖島津液相串聯(lián)質(zhì)譜島津液相串聯(lián)質(zhì)譜?針對(duì)新生兒篩查工作專門開發(fā)了Neonatal Solution新生兒篩查軟件，配合強(qiáng)大的LabSolutions 工作站，為新生兒

5、篩查工作提供完整的方法建立、數(shù)據(jù)采集、數(shù)據(jù)分析及自動(dòng)準(zhǔn)確度管理工具，可便捷、高效處理、分析、管理大批量新生兒篩查數(shù)據(jù)。?經(jīng)過Neonatal Solution的處理，自動(dòng)得到各組分的計(jì)算結(jié)果，根據(jù)預(yù)設(shè)的限值，自動(dòng)使用各種顏色標(biāo)注超出限值的結(jié)果。利用利用MALDI-TOF-MSMALDI-TOF-MS檢測(cè)嬰兒遺傳疾病檢測(cè)嬰兒遺傳疾病?利用飛行時(shí)間質(zhì)譜檢測(cè)基因是近年來(lái)的新技術(shù)，它對(duì)某些基因突變型遺傳疾病檢出率較高，與傳統(tǒng) 常用基因檢測(cè)方法相比，具有檢測(cè)位點(diǎn)多、覆蓋率高、高通量等特點(diǎn)，能夠滿 足臨床要求，為患兒未來(lái)的婚育、用藥及提早干預(yù)提供了積極有效的遺傳指導(dǎo)意義。什么是什么是MALDI-TOF-M

6、SMALDI-TOF-MSMALDI-TOF-MSMatrix-Assisted Laser Desorption Ionization Time of Flight Mass Spectrometry基質(zhì)輔助 激光 解吸電離 飛行時(shí)間 質(zhì)譜這項(xiàng)技術(shù)是由是由島津制作所的田中耕一先生和美國(guó)科學(xué)家約翰芬恩 一起發(fā)明的，二人也因此項(xiàng)發(fā)明贏得了2002 年的諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)原原理理sample plate+sample platesample plateMALDI 與其他的電離方式不同，樣本在基質(zhì)的保護(hù)下幾乎不受傷害。基質(zhì)在激光的照射下吸收了激光的能量，電離氣化，樣本接受了基質(zhì)電離放出的質(zhì)子從而帶電，這樣

7、樣本分子在基質(zhì)氣相的包裹下，進(jìn)入下一步驟。使用MALDI 電離出的生物大分子是真正“活”著的生物大分子。應(yīng)應(yīng)用用因MALTI-TOF-MS具有的檢測(cè)位點(diǎn)多、覆蓋率高、高通量等特點(diǎn)，無(wú)錫市婦幼保健醫(yī)院已經(jīng)為新生兒篩查應(yīng)用此技術(shù)做出了試驗(yàn)。醫(yī)院選擇了2796 例新生兒為研究對(duì)象，采集足跟血并 提取基 因組 D N A，針對(duì) 中國(guó)人群特 點(diǎn)，進(jìn)行 4 個(gè)基 因(GJB2，C JB3，SLC26A 4 和 12s rR N A)20 個(gè) 突變位點(diǎn) 的基 因突變檢測(cè)，先通過PCR 擴(kuò)增出目的基因片段，然后通過飛行時(shí)間質(zhì)譜檢測(cè)，檢 出耳聾基 因突變新生兒 158 例，攜帶率為 5 65。由此可證明M A

8、LDI TO FM S 對(duì)非綜合征型耳聾患者的突變 檢 出率 較高。雖然該技術(shù)具有高效、快速、判讀簡(jiǎn)易和準(zhǔn)確性高的檢測(cè)特點(diǎn)，有望成為一種極具潛力 的耳聾基因診斷和篩查工具，但成本相對(duì)較高，且不能檢測(cè)到其他未知突變，所以有所局限，但在其他領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用，如質(zhì)量檢測(cè)方向的蛋白、肽鏈的檢測(cè)，還有DNA探針、引物的鑒定，檢測(cè)。引用文章引用文章?無(wú)錫地 區(qū)新生兒耳聾基 因的 M A LD ITO FM S 篩查分 析-中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志2015 年2月?基于質(zhì)譜的D NA 序列測(cè)定進(jìn)展-化學(xué)通報(bào)2000 年2期?串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)在新生兒遺傳代謝性疾病篩查中的應(yīng)用-山東省濟(jì)南市婦幼保健院新生兒疾病篩查中心 250001?島津串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)在新生兒篩查中的應(yīng)用-0407 應(yīng)用文章醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)應(yīng)用文集