《流式細胞儀原理及在急性白血病免疫分型中的應(yīng)用(共10張PPT).pptx》由會員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《流式細胞儀原理及在急性白血病免疫分型中的應(yīng)用(共10張PPT).pptx（10頁珍藏版）》請在匯文網(wǎng)上搜索。

1、流式細胞儀原理及在急性流式細胞儀原理及在急性白血病免疫分型中的應(yīng)用白血病免疫分型中的應(yīng)用 復(fù)旦大學(xué)中美聯(lián)合分子醫(yī)學(xué)檢驗中心第1頁，共10頁。FCM急性白血病免疫分型的特點優(yōu)點：高靈敏度的方法測定細胞表面微弱抗原表達。通過多色的標記測定細胞表面、胞漿和核的抗原表達確定不正常的細胞的細胞系、百分比和這群細胞的成熟度。并能結(jié)合DNA 倍體和細胞周期分析確定該細胞的惡性度。缺點：失去結(jié)構(gòu)上的聯(lián)系，硬化的骨髓不能產(chǎn)生足夠的細胞FCM進行分析。注：FCM 的樣本必須做涂片用于分析不典型細胞，F(xiàn)CM免疫分型每例樣本必須結(jié)合形態(tài)學(xué)。第2頁，共10頁。CD45:WBCcommomantigen正常骨髓血細胞散射

2、光雙參數(shù)點圖（紅細胞溶解后）B系CD19CD1011)CD61/CD41/CD45(M7)T系CD7/CD3HLA-DR:BCells,monocyte,myeloidprogenitors,activatedTcells(ManyAMLsnotM3,）B-lineageALL9)CD5/CD23/CD45/CD19(CLL)9)CD5/CD23/CD45/CD19(CLL)1)IgG1/IgG1/CD45/IgG1高靈敏度的方法測定細胞表面微弱抗原表達。CD45:WBCcommomantigenFCM在白血病免疫分型中影響臨床結(jié)果的三個因素樣本的制備（細胞活力60%,1x106）抗體方案的設(shè)

3、置（所有細胞系，成熟度抗體，預(yù)后指標抗體）FCM的數(shù)據(jù)分析（最關(guān)鍵，最忌諱只報百分比）T系CD7/CD3CD16:NKcells,muturegranulocyte（Notlineagespecific）FCM 的表達方式雙參數(shù)點正陣圖單參數(shù)直方圖第3頁，共10頁。FCM 在白血病免疫分型中影響臨 床結(jié)果的三個因素 樣本的制備（細胞活力60%,1x106）抗體方案的設(shè)置（所有細胞系，成熟度抗體，預(yù)后指標抗體）FCM的數(shù)據(jù)分析（最關(guān)鍵，最忌諱只報百分比）第4頁，共10頁。8)CD103/FMC-7/CD45/CD20(HairycellandLymphoma)CD13CD14T系CD7/CD3C

4、D20cTdTcCD79aB系CD19CD105)CD16/CD11c/CD45/CD13并能結(jié)合DNA倍體和細胞周期分析確定該細胞的惡性度。（Notlineagespecific）CD34:Stemcell,Blastcell(Moreprimitiveleukemias,morecommominBthanTALL)9)CD5/CD23/CD45/CD19(CLL)CD7:Tcells,NKcells,earlymyeloidcellsCD16:NKcells,muturegranulocyte8)IgG(cyt)/IgG(cyt)/CD45細胞系特異的單抗髓系：CD33 CD117 CD1

5、3 CD13 CD14 cMPO淋系T系 CD7/CD3 CD4/CD8 cCD3B系 CD19 CD10 CD20 cTdT cCD79a NK CD2 CD56 CD16第5頁，共10頁。（Not lineage specific）CD34:Stem cell,Blast cell(More primitive leukemias,more commom in B than T ALL)HLA-DR:B Cells,monocyte,myeloid progenitors,activated T cells(Many AMLs not M3,）B-lineage ALLCD16:NK ce

6、lls,muture granulocyteCD64:Granulocytes and monocytes(Monocytic leukemias bright)CD7:T cells,NK cells,early myeloid cellsCD10:Early B cells,mature granulocytesCD45:WBC commom antigen介紹幾個非常有用的單抗第6頁，共10頁。1)1)IgG1/IgG1/CD45/IgG1IgG1/IgG1/CD45/IgG12)2)HLA-DR/CD117/CD45/CD34 (Myeloid)HLA-DR/CD117/CD45/CD

7、34 (Myeloid)3)3)CD14(MY-4)/CD33/CD45/CD64 CD14(MY-4)/CD33/CD45/CD64 4)4)CD7/CD10/CD45/CD19 (Lymphocyte)CD7/CD10/CD45/CD19 (Lymphocyte)5)5)CD16/CD11c/CD45/CD13CD16/CD11c/CD45/CD136)6)CD4/CD8/CD45/CD3 (T cell)CD4/CD8/CD45/CD3 (T cell)7)7)CD16/CD56/CD45/CD2 (NK cell)CD16/CD56/CD45/CD2 (NK cell)8)8)CD10

8、3/FMC-7/CD45/CD20 (Hairy cell and Lymphoma)CD103/FMC-7/CD45/CD20 (Hairy cell and Lymphoma)9)9)CD5/CD23/CD45/CD19 (CLL)CD5/CD23/CD45/CD19 (CLL)10)10)GlyA/CD71/CD45 (M6)GlyA/CD71/CD45 (M6)11)11)CD61/CD41/CD45 (M7)CD61/CD41/CD45 (M7)8)8)IgG(cyt)/IgG(cyt)/CD45IgG(cyt)/IgG(cyt)/CD459)9)cTdT/cCD79a/CD45 (

9、Lymphocyte)cTdT/cCD79a/CD45 (Lymphocyte)10)10)cMPO/cCD3/CD45 (Myeloid)cMPO/cCD3/CD45 (Myeloid)4 color panel(FITC/PE/ECD/PC5)4 color panel(FITC/PE/ECD/PC5)第7頁，共10頁。正常骨髓血細胞散射正常骨髓血細胞散射光雙參數(shù)點圖光雙參數(shù)點圖（紅細胞溶解后（紅細胞溶解后）正常骨髓血細胞正常骨髓血細胞SSC/CD45雙參數(shù)點圖雙參數(shù)點圖第8頁，共10頁。分析SSC/CD45第9頁，共10頁。MDSM0CD45SSCSSCFSCNormal bone marrow第10頁，共10頁。