豬瘟ppt課件.ppt
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1、豬瘟(豬瘟(CSF)1病原學(xué)病原學(xué)豬 瘟 病 毒(Classical Swine Fever Virus),屬黃病毒科、瘟疫病毒屬,有囊膜的RNA病毒,正股單鏈RNA病毒RNA全長12300個(gè)堿基,由11個(gè)基因組成,編碼4種結(jié)構(gòu)蛋白和7種非結(jié)構(gòu)蛋白E2基因編碼的外膜蛋白gp55是主要的免疫蛋白,可誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生有效的免疫保護(hù)2CSFV只有一個(gè)血清型,毒力變化很大強(qiáng)毒株可以引發(fā)急性疫病和高死亡率,中等毒力毒株一般引起亞急性或慢性傳染,慢毒株可以引起豬胎兒和新出生的仔豬死亡CSFV的毒力特性不穩(wěn)定,經(jīng)過豬一代或多代傳代后觀察到毒力增強(qiáng)3培養(yǎng)豬瘟病毒最常用的是豬腎細(xì)胞,病毒在胞漿中復(fù)制,不引起細(xì)胞病變
2、病毒可能在細(xì)胞胞漿內(nèi)成熟,這與在感染細(xì)胞的表面檢測不到病毒抗原相一致4病毒滅活取決于含有病毒的基質(zhì),6010分鐘,細(xì)胞培養(yǎng)液失去感染性;血液中病毒6830分鐘,不能使其滅活該病毒在pH5-10條件下相當(dāng)穩(wěn)定,高于或低于該pH時(shí),病毒的感染性很快被破壞脂溶劑如乙醚、氯仿很快滅活病毒,病毒對于2%氫氧化鈉、氯制劑和復(fù)合醛等藥物敏感5流行病學(xué)流行病學(xué)豬是CSFV惟一的自然宿主和重要的傳染源,患病豬和可疑豬的直接接觸是主要的傳播方式CSFV可通過口、鼻、淚腺分泌物、尿液和糞便排泄出來懷孕母豬接觸慢性CSFV毒株時(shí),病毒可以傳播給子宮中的胎兒 6這種先天性感染造成死胎和弱胎出生,弱胎在出生后很快死亡如果
3、先天感染的仔豬健康出生,并存活數(shù)月,這些豬無疑是病毒的擴(kuò)散源新購進(jìn)的表面健康的感染豬進(jìn)入一個(gè)豬群,是最常見的CSFV暴發(fā)的原因7臨床癥狀臨床癥狀病豬最初出現(xiàn)困倦,尾巴下垂,食欲下降,后期病豬明顯厭食。感染CSFV 6天內(nèi),體溫可高達(dá)42以上,病豬擠堆明顯病程早期,眼睛出現(xiàn)明顯的分泌物,伴有結(jié)膜炎,可能一直發(fā)展到兩眼瞼完全粘合8發(fā)熱初期便秘,接著轉(zhuǎn)變?yōu)樗畼拥狞S綠色下痢,常見病豬嘔吐出帶有很多膽汁的黃色液體病豬出現(xiàn)后肢麻痹,病程的最后階段,腹部、耳、鼻和四肢內(nèi)側(cè)可呈現(xiàn)紫色公豬包皮發(fā)炎,有尿潴留9患急性CSF豬,大多數(shù)在10-20天內(nèi)死亡患亞急性CSF豬,大多在30天內(nèi)死亡患慢性CSF豬,生長嚴(yán)重受
4、阻,形成矮小豬,皮膚出現(xiàn)病變,常見弓背站立,可存活100天以上10先天性CSFV感染可造成流產(chǎn),木乃伊胎兒、畸形胎兒、死胎和有震顫癥狀的弱仔豬出生,或者產(chǎn)出外觀正常的被感染的仔豬在子宮中感染的仔豬,皮膚常見出血,死亡率高先天性感染CSFV豬,在相當(dāng)長時(shí)期內(nèi)呈無病狀態(tài),數(shù)月后才表現(xiàn)出輕度的厭食,沉郁,結(jié)膜炎,下痢,局部運(yùn)動失調(diào),體溫正常,患豬可存活6個(gè)月以上,最終導(dǎo)致死亡11耳、頸、胸腹部及后肢皮膚呈暗紫色耳、頸、胸腹部及后肢皮膚呈暗紫色12肢端皮膚斑點(diǎn)狀出血,公豬包皮皮膚出血肢端皮膚斑點(diǎn)狀出血,公豬包皮皮膚出血13患豬后肢皮膚出血斑點(diǎn)患豬后肢皮膚出血斑點(diǎn)14患豬腹部皮膚出血斑點(diǎn)患豬腹部皮膚出血
5、斑點(diǎn)15患豬全身皮膚出血斑點(diǎn)患豬全身皮膚出血斑點(diǎn)16后期病豬腹瀉,腹部等處皮膚發(fā)紺后期病豬腹瀉,腹部等處皮膚發(fā)紺17豬群體表污臟,精神沉郁,共濟(jì)失調(diào),后肢麻痹豬群體表污臟,精神沉郁,共濟(jì)失調(diào),后肢麻痹18齒齦和唇粘膜潰瘍齒齦和唇粘膜潰瘍19患豬眼發(fā)紅,分泌物增多患豬眼發(fā)紅,分泌物增多20發(fā)病機(jī)理發(fā)病機(jī)理自 然 發(fā) 病 的 條 件 下,CSFV侵入機(jī)體的途徑為口、鼻,偶爾通過結(jié)膜、生殖道粘膜或皮膚擦傷侵入豬體經(jīng)口腔感染后,扁桃體是病毒復(fù)制的最初部位病毒最初感染扁桃體腺窩的上皮細(xì)胞,隨后通過淋巴管擴(kuò)散到周圍的淋巴網(wǎng)狀組織病毒在局部淋巴組織復(fù)制后達(dá)到外周血液,出現(xiàn)病毒血癥,強(qiáng)毒株一般5-6天擴(kuò)散到豬
6、的全身21急性CSF中出現(xiàn)的多發(fā)性出血,是由于血管內(nèi)皮細(xì)胞變性、嚴(yán)重的血小板減少以及纖維蛋白質(zhì)合成障礙急性CSF引起豬只死亡的最主要的原因可能是嚴(yán)重的循環(huán)障礙慢性CSF,病毒擴(kuò)散的慢,在血清和器官中的滴度低22臨床改善期,病毒在血清中的滴度低或缺乏,常常局限于扁桃體、唾液腺、空腸和腎上皮細(xì)胞內(nèi)在血液循環(huán)中同時(shí)存在病毒抗原和抗體,導(dǎo)致抗原-抗體復(fù)合物在腎臟沉積,引起腎小球腎炎23病理變化病理變化急性到亞急性病例中,病理變化為敗血性疫病特征,表現(xiàn)為多發(fā)性出血另外還有消化道、呼吸道和泌尿生殖道的卡他性、纖維素性和出血性炎癥反應(yīng)24淋巴結(jié)和腎臟最常觀察到病變。淋巴結(jié)腫脹和出血,呈現(xiàn)大理石樣外觀,淋巴細(xì)
7、胞排空和網(wǎng)狀細(xì)胞增生(頜下、腹股溝和腸系膜淋巴結(jié))腎臟腫大,點(diǎn)狀到斑狀出血,常發(fā)生在皮質(zhì)表面,呈雀斑腎,髓質(zhì)水腫卡他性到纖維素性支氣管肺炎和胸膜炎口腔粘膜、心臟、肺臟、胃、腸、膀胱有出血點(diǎn)或出血斑,甚至形成潰瘍25脾臟梗死被認(rèn)為是CSF最具診斷性的病變,梗死是由血管栓子栓塞阻塞血流所致,血管栓子是由變性的血管內(nèi)皮細(xì)胞與紅細(xì)胞形成“血泥”狀物梗死呈黑色,脾臟邊緣形成梗死灶腦炎病變,血管周圍套形成,內(nèi)皮細(xì)胞增生、小膠質(zhì)細(xì)胞增生結(jié)節(jié)和局灶壞死膽囊、扁桃體出血、壞死,喉頭、會厭軟骨出血、壞死26持續(xù)性CSF最主要的病變?yōu)樾叵傥s和外周淋巴器官中淋巴細(xì)胞排空以及濾泡明顯持續(xù)性CSFV感染造成腎上腺皮質(zhì)增
8、生,其特征為帶狀區(qū)增寬,球狀區(qū)和網(wǎng)狀區(qū)萎縮常見回腸和結(jié)腸壞死,形成潰瘍,成紐扣狀27淋巴結(jié)出血淋巴結(jié)出血28患豬頜下淋巴結(jié)腫大、出血患豬頜下淋巴結(jié)腫大、出血29患豬腹股溝淋巴結(jié)腫大、出血患豬腹股溝淋巴結(jié)腫大、出血30患豬腸系膜淋巴結(jié)腫大、出血患豬腸系膜淋巴結(jié)腫大、出血31患豬腎臟腫大、點(diǎn)狀出血患豬腎臟腫大、點(diǎn)狀出血32患豬腎臟皮質(zhì)出血、髓質(zhì)水腫患豬腎臟皮質(zhì)出血、髓質(zhì)水腫33左:腎臟小點(diǎn)出血左:腎臟小點(diǎn)出血 右:腎皮質(zhì)區(qū)域小點(diǎn)出血,腎盂粘膜出血斑塊右:腎皮質(zhì)區(qū)域小點(diǎn)出血,腎盂粘膜出血斑塊34患豬扁桃體出血患豬扁桃體出血35患豬喉頭點(diǎn)狀出血患豬喉頭點(diǎn)狀出血36患豬喉頭壞死患豬喉頭壞死37患豬肺臟點(diǎn)
9、狀出血患豬肺臟點(diǎn)狀出血38患豬胃粘膜斑點(diǎn)狀出血患豬胃粘膜斑點(diǎn)狀出血39左:肺散在出血斑點(diǎn)左:肺散在出血斑點(diǎn) 右:胃粘膜有出血斑點(diǎn)右:胃粘膜有出血斑點(diǎn)40混合型豬瘟,肺大理石樣變化混合型豬瘟,肺大理石樣變化41左:心外膜出血左:心外膜出血 右:心內(nèi)膜出血右:心內(nèi)膜出血42患豬腸漿膜點(diǎn)狀出血、膠樣滲出患豬腸漿膜點(diǎn)狀出血、膠樣滲出43結(jié)腸粘膜上的單個(gè)結(jié)腸粘膜上的單個(gè)“紐扣狀腫紐扣狀腫”44盲、結(jié)腸粘膜上單個(gè)及融合潰瘍盲、結(jié)腸粘膜上單個(gè)及融合潰瘍45腸道粘膜出血腸道粘膜出血46盲結(jié)腸扣狀腫盲結(jié)腸扣狀腫47患豬膀胱粘膜點(diǎn)狀出血患豬膀胱粘膜點(diǎn)狀出血48患豬腦水腫、腦脊液增多患豬腦水腫、腦脊液增多49脾出血
10、性梗死,脾臟邊緣呈紫黑色,邊界清楚的隆起斑塊脾出血性梗死,脾臟邊緣呈紫黑色,邊界清楚的隆起斑塊50診斷診斷尸體剖檢中,診斷性的病理變化為淋巴結(jié)、腎臟和其它器官的出血以及脾臟梗死實(shí)驗(yàn)室診斷方法包括:血清學(xué)診斷、分子生物學(xué)診斷51(一)血清學(xué)診斷方法(一)血清學(xué)診斷方法瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)(AGP)熒光抗體試驗(yàn)(FAT)間接血凝試驗(yàn)(IHA):正向和反向中和試驗(yàn):兔體、熒光病毒抗體、過氧化物酶聯(lián)中和試驗(yàn)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)免疫膠體金技術(shù)(IGSS)52瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)可用病豬脾、淋巴結(jié)作為抗原進(jìn)行檢測,瓊擴(kuò)試驗(yàn)操作簡單,不需特殊儀器,費(fèi)用低但特異性和敏感性差,現(xiàn)在豬瘟的診斷一般不采用此方
11、法 532.熒光抗體試驗(yàn)熒光抗體試驗(yàn)熒光抗體檢測豬瘟是一種靈敏而又特異的方法可用FAT直接檢測扁桃體、脾臟、腎臟和回腸遠(yuǎn)端冰凍切片中的抗原也可將病豬扁桃體和脾混合勻漿后接種無豬瘟病毒污染的豬源細(xì)胞(如PK-15),24h-72h后進(jìn)行飛片F(xiàn)AT試驗(yàn),檢查細(xì)胞中是否存在CSFV,這種方法比冰凍組織切片法更為敏感543.間接血凝試驗(yàn)間接血凝試驗(yàn)正正 向向 間間 接接 血血 凝凝 試試 驗(yàn)驗(yàn):利 用CSFV致敏紅細(xì)胞,將待檢血清梯度稀釋后進(jìn)行抗原抗體反應(yīng),根據(jù)紅細(xì)胞的凝集判斷結(jié)果。此法能夠測出豬瘟抗體效價(jià),操作簡單,可用于免疫抗體的監(jiān)測,但此方法的缺點(diǎn)是不能區(qū)分抗體水平是由于疫苗免疫還是野毒感染所引
12、起反反向向間間接接血血凝凝試試驗(yàn)驗(yàn):用豬瘟免疫血清提取IgG,致敏綿羊紅細(xì)胞,用之檢測CSFV。此法能夠檢測組織病料如脾臟、淋巴結(jié)、扁桃體中的CSFV抗原。但由于對組織病料處理方法有差異,而且組織中的血細(xì)胞易造成干擾,非特異性凝集使得結(jié)果判定困難,因而現(xiàn)在己很少應(yīng)用554.中和試驗(yàn)中和試驗(yàn)兔體中和試驗(yàn)兔體中和試驗(yàn)將豬瘟病毒與待檢血清中和后接種兔體,觀察體溫變化曲線當(dāng)待檢血清稀釋度大于1:32時(shí),則表明待檢血清能夠保護(hù)豬群免受CSFV感染當(dāng)待檢血清稀釋度小于1:32時(shí),應(yīng)當(dāng)對豬群進(jìn)行免疫接種56熒光抗體病毒中和試驗(yàn)熒光抗體病毒中和試驗(yàn)此法是國際貿(mào)易指定方法飛片培養(yǎng)PK-15細(xì)胞,將待檢血清563
13、0 min滅活后做適當(dāng)稀 釋,與 等 體 積 的 200 TCID50/0.1 ml的病毒液混合感作2h,最后接入飛片上吸附1h,然后加入維持液孵育2d以上采用直接免疫熒光方法進(jìn)行熒光觀察,并設(shè)立對照組,可發(fā)現(xiàn)對照組有翠綠色光斑,而試驗(yàn)組光斑消失其優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng),操作簡便,不足之處是僅能定性,不能定量57過氧化物酶聯(lián)中和試驗(yàn)過氧化物酶聯(lián)中和試驗(yàn)此法也是國際貿(mào)易指定方法NPLA是將待檢血清稀釋后與200TCID50/50ul的病毒液混合培養(yǎng)一定時(shí)間后接入細(xì)胞,待細(xì)胞長成單層后固定,加入高免豬抗CSFV血清,最后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗豬IgG(IgG-HRPO),作用后加入底物顯色,根據(jù)顏色就
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