尿液干化學(xué)與沉渣1一、尿液檢驗(yàn)?zāi)康哪蛞簷z驗(yàn)是臨床上最常用的重要檢測(cè)項(xiàng)目之一，主要用于泌尿生殖系統(tǒng)疾病、肝膽疾病、代謝性疾?。ㄈ缣悄虿〉龋┘捌渌到y(tǒng)疾病的診斷和鑒別診斷、治療監(jiān)測(cè)及健康普查。2二、尿干化學(xué)分析儀化學(xué)分析儀又稱尿液分析儀（urineanalyzer）,是用干化學(xué)方法檢測(cè)尿中某些成分，有半自動(dòng)和全自動(dòng)兩大類。31.尿液分析儀的試劑帶試劑帶采用多層膜結(jié)構(gòu)，第一層尼龍膜起保護(hù)作用，防止大分子物質(zhì)對(duì)反應(yīng)的污染；第二層絨制層，包括碘酸鹽層和試劑層，碘酸鹽層可破壞維生素C等干擾物質(zhì)，試劑層主要與尿液中所測(cè)定物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生顏色變化；第三層是吸水層，可使尿液均勻快速地浸入，并能抑制尿液流到相鄰反應(yīng)區(qū)；最后一層選取尿液不浸潤(rùn)的塑料片作為支持體。45 尿液分析儀工作原理尿液分析儀工作原理分析儀采用專用的試紙帶，通過測(cè)定試帶顏色變化，求得尿液中各種成份的濃度。6尿液分析儀一般采用雙波長(zhǎng)法測(cè)定試劑塊的顏色變化。測(cè)定波長(zhǎng)：它是被測(cè)試劑塊的敏感特征波長(zhǎng)；參比波長(zhǎng)：是被測(cè)試劑塊不敏感的波長(zhǎng)，用于消除背景光和其它雜散光的影響。各種試劑塊都有相應(yīng)的測(cè)定波長(zhǎng)，其NIT、KET、BIL、URO原的測(cè)定波長(zhǎng)為550nm，pH、GLU、PRO、VitC、BLD的測(cè)定波長(zhǎng)為620nm。各試劑塊所選用的參考波長(zhǎng)為720nm。72.儀器結(jié)構(gòu)與組成尿液分析儀一般由機(jī)械系統(tǒng)、光學(xué)系統(tǒng)、電路系統(tǒng)三部分組成。8（二）檢測(cè)參數(shù)：目前常用的檢測(cè)參數(shù)包括酸堿度、蛋白質(zhì)、葡萄糖、酮體、膽紅素、尿膽原、紅細(xì)胞或血紅蛋白（或隱血）、亞硝酸鹽、白細(xì)胞、比重、維生素C等（下圖）910方法學(xué)評(píng)價(jià)主要優(yōu)點(diǎn)：標(biāo)本用料少；速度快、項(xiàng)目多；重復(fù)性好、準(zhǔn)確性高；適于大批量標(biāo)本篩檢。11主要不足：不能替代病理性尿標(biāo)本檢查，對(duì)白細(xì)胞、管型、結(jié)晶的檢測(cè)屬于間接檢測(cè)。不利判斷紅細(xì)胞的形態(tài)特征。12蛋白質(zhì)在PH3.2條件下，四溴酚藍(lán)產(chǎn)生的陰離子與帶陽離子的蛋白質(zhì)結(jié)合使顏色發(fā)生改變，這種現(xiàn)象稱指示劑蛋白誤差法。測(cè)尿蛋白以清蛋白為主，對(duì)球蛋白、血紅蛋白、本周蛋白和黏蛋白不夠靈敏，故“陰性”不能排除這些蛋白的存在。對(duì)于高緩沖的堿性尿可能得到假陽性結(jié)果。如果尿液被季銨鹽類化合物及某些防腐劑或清洗劑污染也會(huì)導(dǎo)致假陽性。13葡萄糖是在過氧化物酶的作用下生產(chǎn)葡萄糖酸和過氧化氫，過氧化氫在過氧化物酶作用下釋放新生態(tài)氧O,O氧化KI發(fā)生顏色改變。14酮體尿酮體包括乙酰乙酸、丙酮、-羥丁酸三種。尿中乙酰乙酸在堿性條件下與亞硝基鐵氰化鈉反應(yīng)，不與丙酮或-羥丁酸反應(yīng)。15白細(xì)胞白細(xì)胞試塊主要與粒細(xì)胞中的酯酶反應(yīng)，而單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞中無酯酶，故需結(jié)合顯微鏡檢查。16VitC該項(xiàng)目并非用于人體內(nèi)VitC的定量，而是用于判斷試帶法其它檢測(cè)項(xiàng)目的結(jié)果是否可靠，高濃度的VitC對(duì)葡萄糖、膽紅素、血、亞硝酸鹽會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重的負(fù)干擾。17三、尿液有形成分分析儀檢查 傳統(tǒng)的尿有形成分檢查是在顯微鏡下檢查離心沉淀后的尿有形成分，費(fèi)時(shí)費(fèi)力、誤差大、重復(fù)性差、不能定量、受人為因素影響、無統(tǒng)一質(zhì)控物、難以進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控。1988年，美國(guó)國(guó)際遙控影響系統(tǒng)有限公司研制生產(chǎn)了世界上第一臺(tái)高速攝影機(jī)式尿有形成分自動(dòng)分析儀。隨著現(xiàn)代科技的進(jìn)步，目前，有形成分分析儀主要有2大類：尿有形成分直接鏡檢影像分析儀流式細(xì)胞術(shù)和電阻抗檢測(cè)相結(jié)合的全自動(dòng)尿有形成分分析儀。18（一）影像式尿有形成分分析儀：其原理與人工顯微鏡鏡檢原理基本相似，都是直觀地觀察有形成分的形態(tài)，在相差顯微鏡下數(shù)碼攝影系統(tǒng)對(duì)每個(gè)層流經(jīng)過的標(biāo)本攝像，計(jì)算機(jī)進(jìn)行圖像分析，提取有形成分的大小、對(duì)比度、質(zhì)地、形狀特征，運(yùn)用形態(tài)識(shí)別軟件自動(dòng)識(shí)別和分類尿液有形成分。與普通顯微鏡法相比，具有無污染、定量、簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)。但對(duì)雜質(zhì)多的標(biāo)本可導(dǎo)致圖像模糊難以準(zhǔn)確辨認(rèn)，假陽性率高；有些結(jié)晶和真菌易被誤認(rèn)為紅細(xì)胞，往往需要依靠傳統(tǒng)顯微鏡檢查。19（二）全自動(dòng)尿有形成分分析儀其設(shè)計(jì)思路與顯微鏡檢測(cè)原理不同，應(yīng)用了流式細(xì)胞術(shù)和電阻抗分析原理。下面以SysmexUF系列為例作簡(jiǎn)要介紹：20211儀器組成：主要包括光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)、液壓系統(tǒng)、電阻抗檢測(cè)系統(tǒng)等222尿液有形成分染色：其染料成分主要有9-氮雜菲:主要染色白細(xì)胞的核酸成分，在480nm光激發(fā)時(shí)產(chǎn)生610nm橙黃色光波，用于區(qū)別有核與無核細(xì)胞（白、紅細(xì)胞，病理管型與透明管型等）.羧花氰:其穿透能力強(qiáng)，主要與細(xì)胞膜（紅細(xì)胞膜、核膜線粒體等）的脂質(zhì)成分發(fā)生非特異性結(jié)合，用于區(qū)別WBC體積大?。ㄈ缟掀ぜ?xì)胞與白細(xì)胞的區(qū)別）。233.尿液有形成分檢測(cè)：定量稀釋的尿標(biāo)本經(jīng)稀釋、加溫、染色后進(jìn)入鞘液流動(dòng)池，單個(gè)縱列的有形成分經(jīng)氬激光光束照射，產(chǎn)生不同程度的熒光強(qiáng)度（熒光強(qiáng)度與有形成分和染料的結(jié)合程度成正比），結(jié)合前向散射光和側(cè)向散射光的信號(hào)分析尿中有形成分。綜合分析做出紅細(xì)胞、白細(xì)胞、細(xì)菌、管型等的散點(diǎn)圖及定量報(bào)告，最后得到每份尿標(biāo)本的直方圖和散點(diǎn)圖。24254方法學(xué)評(píng)價(jià)：全自動(dòng)尿有形成分分析儀較顯微鏡檢查有明顯優(yōu)勢(shì)：不需離心，可自動(dòng)進(jìn)樣。標(biāo)本用量少，快速、高效。方法程序統(tǒng)一，易于標(biāo)準(zhǔn)化和質(zhì)量控制。26SysmexUF系列尿沉渣分析儀目前在中國(guó)的儀器保有數(shù)量大約有800臺(tái)左右，并且隨著尿常規(guī)定量檢查的不斷的普及，數(shù)量仍呈一個(gè)上升的趨勢(shì)。UF項(xiàng)目具有檢測(cè)速度快、結(jié)果準(zhǔn)確、重復(fù)性好、自動(dòng)進(jìn)樣、自動(dòng)混均、自動(dòng)化程度高等優(yōu)點(diǎn)，但是該項(xiàng)目的檢測(cè)成本較高，原裝試劑的每人份的檢測(cè)成本大約平均在8元錢，儀器的平均購置成本大約在50萬左右。按照五年的使用周期，一年的折舊費(fèi)是十萬元，若以一年4萬個(gè)標(biāo)本計(jì)算折舊成本為每一個(gè)標(biāo)本2.5元。該項(xiàng)目收費(fèi)全國(guó)平均水平為15元20元，所以從經(jīng)濟(jì)利益角度考慮，都認(rèn)為該項(xiàng)目經(jīng)濟(jì)效益并不理想。國(guó)產(chǎn)試劑的市場(chǎng)供貨價(jià)格要比原裝試劑低30%左右，從成本的角度值得考慮。2728