土壤過氧化氫酶活性測(cè)定方法(完整)(共1頁).doc
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1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上高錳酸鉀滴定法1. 試劑配制: (1)0.3%過氧化氫溶液: (1:100 30%的H2O2和水) (0.5molH2O2+49.5ml蒸餾水) (1ml30% H2O2+99ml蒸餾水) (2)3N硫酸:(10ml硫酸+50ml水) (3)0.1N高錳酸鉀溶液 :(1.58gKMnO4+100ml蒸餾水) 2. 高錳酸鉀的標(biāo)定:準(zhǔn)確稱取約0.2 g在110干燥至恒量的基準(zhǔn)草酸鈉。加入250 mL新煮沸過的冷水、10 mL硫酸,攪拌使之溶解。將草酸鈉溶液
2、加熱到75 85 (即開始冒蒸氣時(shí)的溫度),趁熱用待標(biāo)KMnO4 溶液進(jìn)行滴定。開始滴定時(shí)反應(yīng)速度很慢,待溶液中產(chǎn)生M n2+后,反應(yīng)速度加快,但滴定時(shí)仍必須是逐滴加入,至溶液呈粉紅色,半分鐘內(nèi)不褪色即為終點(diǎn)。注意滴定結(jié)束時(shí)的溫度不應(yīng)低于60。2MnO4- + 5C2O42- + 16H+ 75 85 Mn 2+ +10CO2 + 8H2O。參考:高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定方法的改進(jìn)及注意事項(xiàng)王繼蓮3. 測(cè)定: 準(zhǔn)確稱取2 g風(fēng)干土置100 mL錐形瓶加入40 mL蒸餾水和5 mL0.3%過氧化氫(現(xiàn)配),另設(shè)對(duì)照 (40 mL蒸餾水和5 mL0.3%過氧化氫)在往復(fù)式振蕩機(jī)上振蕩20 m
3、in加入5 mL3N硫酸(以穩(wěn)定未分解的H2O2)用慢速型濾紙過濾,吸取25 ml濾液,用0.1N高錳酸鉀的滴定至淡粉紅色 4結(jié)果計(jì)算 土壤的過氧化氫酶活性,以單位土重的0.1N KMnO4毫升數(shù)(對(duì)照與試驗(yàn)測(cè)定的差) 表示。備注: 以容量法測(cè)H2O2的酶活:Kappen(1913)首先介紹硫酸存在下用高錳酸鉀滴定剩余的過氧化氫測(cè)定酶活。此法根據(jù)H2O2與土壤相互作用時(shí),未分解的H2O2的數(shù)量用容量法(常用高錳酸鉀滴定未分解的H2O2)測(cè)定H2O2的酶活 2 KMnO45H2O23H2SO42MnSO4K2SO48H2O5O2 土壤H2O2酶促過氧化氫的分解有利于防止它對(duì)生物體的毒害作用。專心-專注-專業(yè)
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