《生物化學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室基本知識(shí)匯編課件.ppt》由會(huì)員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《生物化學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室基本知識(shí)匯編課件.ppt（89頁(yè)珍藏版）》請(qǐng)?jiān)趨R文網(wǎng)上搜索。

1、生物化學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室基本知識(shí)n教學(xué)目的和要求：教學(xué)目的和要求：1 1、掌握掌握實(shí)驗(yàn)用純水的三級(jí)標(biāo)準(zhǔn)；實(shí)驗(yàn)方法的分級(jí)、標(biāo)準(zhǔn)品分級(jí)實(shí)驗(yàn)用純水的三級(jí)標(biāo)準(zhǔn)；實(shí)驗(yàn)方法的分級(jí)、標(biāo)準(zhǔn)品分級(jí)及相互之間的聯(lián)系；實(shí)驗(yàn)誤差的定義、分類和表示方法；方法及相互之間的聯(lián)系；實(shí)驗(yàn)誤差的定義、分類和表示方法；方法評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)尤其是回收實(shí)驗(yàn)和干擾實(shí)驗(yàn)的原理和操作；診斷性能評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)尤其是回收實(shí)驗(yàn)和干擾實(shí)驗(yàn)的原理和操作；診斷性能評(píng)價(jià)的指標(biāo)。評(píng)價(jià)的指標(biāo)。2 2、熟悉熟悉純水的制備方法；實(shí)驗(yàn)方法選擇的的原則和步驟；方純水的制備方法；實(shí)驗(yàn)方法選擇的的原則和步驟；方法評(píng)價(jià)的基本內(nèi)容和步驟；方法評(píng)價(jià)的指標(biāo)；參考值和醫(yī)學(xué)決法評(píng)價(jià)的基本內(nèi)容和步驟；方

2、法評(píng)價(jià)的指標(biāo)；參考值和醫(yī)學(xué)決定水平的概念。定水平的概念。3 3、了解了解水的純度檢查；方法性能判斷的指標(biāo)；受試者工作曲水的純度檢查；方法性能判斷的指標(biāo)；受試者工作曲線的應(yīng)用和用途。線的應(yīng)用和用途。2第一節(jié)第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)用純水實(shí)驗(yàn)用純水天然水天然水 自來(lái)水自來(lái)水 實(shí)驗(yàn)用純水實(shí)驗(yàn)用純水 經(jīng)簡(jiǎn)單的物理、化學(xué)經(jīng)簡(jiǎn)單的物理、化學(xué)方法處理，除去懸浮方法處理，除去懸浮物質(zhì)和部分無(wú)機(jī)鹽物質(zhì)和部分無(wú)機(jī)鹽 經(jīng)蒸餾、電滲析等處理，經(jīng)蒸餾、電滲析等處理，除去雜質(zhì)除去雜質(zhì)(懸浮物懸浮物,膠體膠體物質(zhì)物質(zhì),溶解物質(zhì)溶解物質(zhì))3一、純水的制備方法一、純水的制備方法 n蒸餾法蒸餾法:優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn):設(shè)備簡(jiǎn)單設(shè)備簡(jiǎn)單缺點(diǎn)缺點(diǎn):1:1、

3、揮發(fā)性物質(zhì)難以去除；、揮發(fā)性物質(zhì)難以去除；2 2、耗能大，耗能水多；、耗能大，耗能水多；3 3、需注意管道清潔、需注意管道清潔 純度：純度：25時(shí)時(shí)1101105 5cmcm如何如何安裝：安裝：4n離子交換法：離子交換法：氫型強(qiáng)酸性氫型強(qiáng)酸性陽(yáng)離子交換樹脂陽(yáng)離子交換樹脂(RSO3H(RSO3H，R R為母體為母體)，其中的，其中的H+H+與與CaCa2+2+、NaNa+等金屬離等金屬離子發(fā)生交換反應(yīng)，而將鈣、鎂離子除去子發(fā)生交換反應(yīng)，而將鈣、鎂離子除去 氫氧型強(qiáng)堿性氫氧型強(qiáng)堿性陰離子交換樹脂陰離子交換樹脂(RNOH(RNOH，RR為母體為母體)，其中的，其中的OH-OH-與水中的與水中的CLC

4、L-、碳酸根等陰離子發(fā)生交換反應(yīng)，而將它們碳酸根等陰離子發(fā)生交換反應(yīng)，而將它們除去：除去：5優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn):除了可去除除了可去除雜質(zhì)離子雜質(zhì)離子以外兼具吸附以外兼具吸附電中性雜質(zhì)電中性雜質(zhì)和過(guò)濾和過(guò)濾顆顆粒雜質(zhì)粒雜質(zhì)的作用。的作用。缺點(diǎn)缺點(diǎn):純度：純度：25時(shí)時(shí)5105106 6cmcm2 2、由于離于交換為、由于離于交換為可逆反應(yīng)，可逆反應(yīng)，故去離子水并非絕對(duì)不含離子故去離子水并非絕對(duì)不含離子 1 1、設(shè)備較復(fù)雜，成本較高；、設(shè)備較復(fù)雜，成本較高；6n電滲透法電滲透法 在電場(chǎng)作用下水中在電場(chǎng)作用下水中各種陽(yáng)離子趨向陰極各種陽(yáng)離子趨向陰極，各種陰離子趨向陽(yáng)極各種陰離子趨向陽(yáng)極但但陽(yáng)離子只能透過(guò)陽(yáng)膜陽(yáng)

5、離子只能透過(guò)陽(yáng)膜而被相鄰的陰膜所阻，而被相鄰的陰膜所阻，陰離子與此相反陰離子與此相反這樣，在這樣，在一些隔間內(nèi)集中了陽(yáng)離子和陰離子，即形成一些隔間內(nèi)集中了陽(yáng)離子和陰離子，即形成含鹽多的濃水含鹽多的濃水，在另一些隔，在另一些隔間內(nèi)由于陰、陽(yáng)離子的遷出降低了含鹽量形成間內(nèi)由于陰、陽(yáng)離子的遷出降低了含鹽量形成淡水淡水 71 1、不需要消耗化學(xué)藥品，設(shè)備簡(jiǎn)單，操作方便。、不需要消耗化學(xué)藥品，設(shè)備簡(jiǎn)單，操作方便。消耗電能，當(dāng)原水中鹽濃度過(guò)低時(shí)，溶液電阻大，用電滲消耗電能，當(dāng)原水中鹽濃度過(guò)低時(shí)，溶液電阻大，用電滲析也不經(jīng)濟(jì)析也不經(jīng)濟(jì) 純度純度:25:25時(shí)時(shí)10104 4105cmcm2 2、對(duì)于含鹽量高

6、的海水等用此法比用離子交換法更為經(jīng)濟(jì)、對(duì)于含鹽量高的海水等用此法比用離子交換法更為經(jīng)濟(jì)優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn):缺點(diǎn)缺點(diǎn):8n炭吸附法炭吸附法:活性炭是一種非常優(yōu)活性炭是一種非常優(yōu)良的吸附劑，它是利用良的吸附劑，它是利用木木炭、各種果殼和優(yōu)質(zhì)煤炭、各種果殼和優(yōu)質(zhì)煤等等作為原料，通過(guò)物理和化作為原料，通過(guò)物理和化學(xué)方法對(duì)原料進(jìn)行破碎、學(xué)方法對(duì)原料進(jìn)行破碎、過(guò)篩、催化劑活化、漂洗、過(guò)篩、催化劑活化、漂洗、烘干和篩選等一系列工序烘干和篩選等一系列工序加工制造而成。加工制造而成。91 1、設(shè)備簡(jiǎn)單，操作方便。、設(shè)備簡(jiǎn)單，操作方便。純水制備效率低純水制備效率低.,.,僅作為各種制備純水配套的一種措施僅作為各種制備純水配

7、套的一種措施.2 2、它具有、它具有物理吸附和化學(xué)吸附物理吸附和化學(xué)吸附的雙重特性的雙重特性,可以有選擇的可以有選擇的吸附氣相、液相中的各種有機(jī)物質(zhì)吸附氣相、液相中的各種有機(jī)物質(zhì).優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn):缺點(diǎn)缺點(diǎn):10n超濾膜法超濾膜法特點(diǎn)特點(diǎn):僅能除去僅能除去膠體細(xì)菌等大分子物質(zhì)和懸浮物膠體細(xì)菌等大分子物質(zhì)和懸浮物,所得水還需進(jìn)一步純化所得水還需進(jìn)一步純化.也是作為各種制備純水配套的一種措施也是作為各種制備純水配套的一種措施.11n混合純化系統(tǒng)混合純化系統(tǒng)醫(yī)用超純水設(shè)備醫(yī)用超純水設(shè)備 實(shí)驗(yàn)室純水系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室純水系統(tǒng) 櫥下式全自動(dòng)逆滲透純水機(jī)櫥下式全自動(dòng)逆滲透純水機(jī)特點(diǎn)特點(diǎn):多種方法混合純化多種方法混合純化,

8、可獲得純度很高的二級(jí)甚至一級(jí)純水可獲得純度很高的二級(jí)甚至一級(jí)純水.12二、水的純度檢查二、水的純度檢查 用電導(dǎo)儀或兆歐表測(cè)定其用電導(dǎo)儀或兆歐表測(cè)定其電導(dǎo)率電導(dǎo)率或或電阻率電阻率用特定試劑檢測(cè)水中殘留的用特定試劑檢測(cè)水中殘留的CaCa2+2+、MgMg2+2+、CICI-、SOSO4 42-2-、硅酸鹽硅酸鹽等成分的含量等成分的含量微生物含量檢測(cè)微生物含量檢測(cè)單位：電導(dǎo)：西門子（電導(dǎo)：西門子（s）電導(dǎo)率：電導(dǎo)率：scm-1電阻：電阻：電阻率：電阻率：cm13CAP:美國(guó)病理學(xué)家學(xué)會(huì)美國(guó)病理學(xué)家學(xué)會(huì)n實(shí)驗(yàn)用純水標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)用純水標(biāo)準(zhǔn)14NCCLS:美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)1

9、5級(jí)水級(jí)水:臨床實(shí)驗(yàn)室用水臨床實(shí)驗(yàn)室用水,一般實(shí)驗(yàn)檢驗(yàn)一般實(shí)驗(yàn)檢驗(yàn);級(jí)水級(jí)水:特殊實(shí)驗(yàn)如酶活性測(cè)定、電解質(zhì)分析等特殊實(shí)驗(yàn)如酶活性測(cè)定、電解質(zhì)分析等;級(jí)水級(jí)水:用做儀器、器皿的自來(lái)水清潔后沖洗用做儀器、器皿的自來(lái)水清潔后沖洗.n實(shí)驗(yàn)用純水的用途實(shí)驗(yàn)用純水的用途16n實(shí)驗(yàn)用純水的貯存、運(yùn)輸和使用實(shí)驗(yàn)用純水的貯存、運(yùn)輸和使用:一般選用一般選用聚乙烯或聚丙烯聚乙烯或聚丙烯桶（瓶）貯存，貯存時(shí)間不桶（瓶）貯存，貯存時(shí)間不宜太長(zhǎng)，使用時(shí)應(yīng)避免一切可能的污染，切勿用手接觸純宜太長(zhǎng)，使用時(shí)應(yīng)避免一切可能的污染，切勿用手接觸純水或容器內(nèi)壁水或容器內(nèi)壁.盛裝藥品盛裝藥品,試劑試劑17第二節(jié)第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)用玻璃儀器實(shí)

10、驗(yàn)用玻璃儀器(了解了解)18第三節(jié)第三節(jié) 實(shí)驗(yàn)方法的選擇實(shí)驗(yàn)方法的選擇 選擇選擇準(zhǔn)確可靠準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)方法的實(shí)驗(yàn)方法為為臨床臨床提供提供準(zhǔn)確可靠準(zhǔn)確可靠的信息的信息臨床生化檢驗(yàn)分析臨床生化檢驗(yàn)分析u實(shí)驗(yàn)方法選擇的目的實(shí)驗(yàn)方法選擇的目的u實(shí)驗(yàn)方法的分級(jí)實(shí)驗(yàn)方法的分級(jí) u標(biāo)準(zhǔn)試劑的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)試劑的分級(jí)保保證證19一、實(shí)驗(yàn)方法選擇的目的一、實(shí)驗(yàn)方法選擇的目的根本目的：根本目的：各實(shí)驗(yàn)室按照方法選擇的原則結(jié)合自身?xiàng)l件，確各實(shí)驗(yàn)室按照方法選擇的原則結(jié)合自身?xiàng)l件，確定定合適合適的某項(xiàng)目的檢測(cè)方法。的某項(xiàng)目的檢測(cè)方法。保證擬使用的檢測(cè)方法在正式應(yīng)用于臨床分析病保證擬使用的檢測(cè)方法在正式應(yīng)用于臨床分析病人標(biāo)本之

11、前，對(duì)方法性能及可能引入的誤差進(jìn)行人標(biāo)本之前，對(duì)方法性能及可能引入的誤差進(jìn)行了了解解，作出初步評(píng)估。，作出初步評(píng)估。20二、實(shí)驗(yàn)方法的分級(jí)二、實(shí)驗(yàn)方法的分級(jí)分級(jí)依據(jù)分級(jí)依據(jù)：IFCCIFCC根據(jù)分析方法的根據(jù)分析方法的準(zhǔn)確性與精密度準(zhǔn)確性與精密度的不同。的不同。v決定性方法決定性方法 v參考方法參考方法 v常規(guī)方法常規(guī)方法 分為三級(jí)：分為三級(jí)：21（一）決定性方法（一）決定性方法definitive methoddefinitive methodp定義定義：是指是指準(zhǔn)確度最高，系統(tǒng)誤差最小準(zhǔn)確度最高，系統(tǒng)誤差最小，經(jīng)過(guò)詳細(xì)的研究，經(jīng)過(guò)詳細(xì)的研究，沒(méi)有沒(méi)有發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生誤差的原因或在某些方面不夠明確的

12、方法發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生誤差的原因或在某些方面不夠明確的方法，其測(cè)定結(jié)，其測(cè)定結(jié)果與真值最為接近。果與真值最為接近。p主要方法：主要方法：重量分析法重量分析法、中子活化法、同位素稀釋、中子活化法、同位素稀釋-質(zhì)譜分析法（質(zhì)譜分析法（ID-MSID-MS）22p應(yīng)用：應(yīng)用：由于由于技術(shù)要求太高，費(fèi)用昂貴技術(shù)要求太高，費(fèi)用昂貴，這類方法不直接用于鑒定，這類方法不直接用于鑒定常規(guī)方法的準(zhǔn)確性，只用于常規(guī)方法的準(zhǔn)確性，只用于評(píng)價(jià)參考方法與一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品評(píng)價(jià)參考方法與一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品。儲(chǔ)氫重量分析儀儲(chǔ)氫重量分析儀 (北京英格海德分析技術(shù)有限公司北京英格海德分析技術(shù)有限公司)23（二）參考方法（二）參考方法reference

13、methodp定義：定義：是指是指準(zhǔn)確度與精密度已經(jīng)被充分證實(shí)準(zhǔn)確度與精密度已經(jīng)被充分證實(shí)，且經(jīng)公認(rèn)的權(quán)，且經(jīng)公認(rèn)的權(quán)威機(jī)構(gòu)（國(guó)家主管部門、相關(guān)學(xué)術(shù)團(tuán)體和國(guó)際性組織等）頒威機(jī)構(gòu)（國(guó)家主管部門、相關(guān)學(xué)術(shù)團(tuán)體和國(guó)際性組織等）頒布的方法。這類方法布的方法。這類方法干擾因素少干擾因素少，系統(tǒng)誤差很小，有適當(dāng)?shù)南到y(tǒng)誤差很小，有適當(dāng)?shù)撵`敏度、特異度、較寬的分析范圍并且線性良好靈敏度、特異度、較寬的分析范圍并且線性良好，重復(fù)測(cè)定，重復(fù)測(cè)定中的中的隨機(jī)誤差可以忽略不計(jì)隨機(jī)誤差可以忽略不計(jì)。p主要方法：主要方法：原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法、火焰光度法、免疫化學(xué)法，離子交換層析法等、火焰光度法、免疫化學(xué)

14、法，離子交換層析法等24p應(yīng)用：應(yīng)用：能在能在條件優(yōu)越條件優(yōu)越的實(shí)驗(yàn)室作的實(shí)驗(yàn)室作常規(guī)分析常規(guī)分析，主要用于鑒定主要用于鑒定常規(guī)方法，評(píng)價(jià)其誤差大小、干擾因素并決定是否可以常規(guī)方法，評(píng)價(jià)其誤差大小、干擾因素并決定是否可以被接受；用于鑒定二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品和為質(zhì)控血清定值；用于被接受；用于鑒定二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品和為質(zhì)控血清定值；用于商品試劑盒的質(zhì)量評(píng)價(jià)。商品試劑盒的質(zhì)量評(píng)價(jià)。25（三）常規(guī)方法（三）常規(guī)方法（routine method）p定義：定義：應(yīng)具有應(yīng)具有足夠足夠的精密度、準(zhǔn)確度和特異度，有的精密度、準(zhǔn)確度和特異度，有適當(dāng)適當(dāng)?shù)姆治龇秶姆治龇秶?，?jīng)濟(jì)實(shí)用經(jīng)濟(jì)實(shí)用，其性能指標(biāo)符合臨床或其它目的的需要。

15、其性能指標(biāo)符合臨床或其它目的的需要。p主要方法：主要方法：溴甲酚綠法、雙縮脲法、溴甲酚綠法、雙縮脲法、J-GJ-G法等。法等。p應(yīng)用：應(yīng)用：臨床臨床常規(guī)檢驗(yàn)常規(guī)檢驗(yàn)使用，使用，常規(guī)方法在常規(guī)方法在作出評(píng)定以后，經(jīng)有關(guān)學(xué)術(shù)組織認(rèn)可，作出評(píng)定以后，經(jīng)有關(guān)學(xué)術(shù)組織認(rèn)可，可以作為可以作為推薦方法（推薦方法（recommended recommended methodmethod）。偏差已知方法偏差已知方法偏離未知方法偏離未知方法26項(xiàng)目項(xiàng)目決定性方法決定性方法參考方法參考方法鈣鈣ID-MS原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法氯氯電量滴定法、中子活化法電量滴定法、中子活化法電流滴定法電流滴定法鎂鎂ID-

16、MS原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法磷磷ID-MS鉀鉀ID-MS、中子活化法中子活化法火焰光度法火焰光度法鈉鈉重量分析法、中子活化法重量分析法、中子活化法火焰光度法火焰光度法白蛋白白蛋白免疫化學(xué)法免疫化學(xué)法總蛋白總蛋白雙縮脲法雙縮脲法肌酐肌酐ID-MS、離子交換層析法離子交換層析法離子交換層析法離子交換層析法尿素尿素ID-MS尿素酶法尿素酶法尿酸尿酸ID-MS尿酸酶法（紫外法尿酸酶法（紫外法）膽紅素膽紅素重氮反應(yīng)法重氮反應(yīng)法葡萄糖葡萄糖ID-MS己糖激酶法己糖激酶法膽固醇膽固醇ID-MSAbell-Kendall法，膽固醇氧化酶法法，膽固醇氧化酶法甘油三酯甘油三酯ID-MS酶法酶法AST（GOT）MDH-NADH法法ALT（GPT）LDH-NADH法法轉(zhuǎn)肽酶（轉(zhuǎn)肽酶（r-GT）連續(xù)監(jiān)測(cè)產(chǎn)物生成法連續(xù)監(jiān)測(cè)產(chǎn)物生成法肌酸激酶肌酸激酶 NAD+偶聯(lián)法偶聯(lián)法27三、標(biāo)準(zhǔn)試劑的分級(jí)三、標(biāo)準(zhǔn)試劑的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)試劑（標(biāo)準(zhǔn)品）的定義：標(biāo)準(zhǔn)試劑（標(biāo)準(zhǔn)品）的定義：國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)將標(biāo)準(zhǔn)品（參考物，國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)將標(biāo)準(zhǔn)品（參考物，reference material）的定義暫定）的定義暫定為：它的為：它的