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1、檢測(cè)生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)檢測(cè)生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì) 1.實(shí)驗(yàn)原理 斐林試劑斐林試劑蘇丹蘇丹橘黃色橘黃色紅色紅色磚紅色沉淀磚紅色沉淀紫色紫色蘇丹蘇丹 雙縮脲試劑雙縮脲試劑鑒定物質(zhì)鑒定物質(zhì)試劑試劑實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象還原性糖還原性糖脂肪脂肪蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)淀粉淀粉 碘液碘液 藍(lán)色藍(lán)色 生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定l實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理選材：含糖量較高的選材：含糖量較高的白色或近于白色的植物組織白色或近于白色的植物組織(排除色素對(duì)排除色素對(duì)顯色的干擾顯色的干擾)，蘋果、梨最好，蘋果、梨最好。l實(shí)驗(yàn)流程實(shí)驗(yàn)流程(步驟步驟)1.可溶性還原糖可

2、溶性還原糖 制備組織樣液：制備組織樣液：制漿：去皮、切塊、研磨，制漿：去皮、切塊、研磨，過濾：（用單層紗布）過濾：（用單層紗布）取液：取液：（mL）顯色反應(yīng)顯色反應(yīng) mL組織樣液剛配制的斐林試劑mL現(xiàn)象：現(xiàn)象：(用前混勻用前混勻)5065.C水浴水浴加熱加熱2min葡萄糖，果糖，葡萄糖，果糖，麥芽糖；麥芽糖；蔗糖為非還原蔗糖為非還原性糖性糖還原糖的檢測(cè)和觀察：還原糖的檢測(cè)和觀察：2.脂肪的鑒定脂肪的鑒定 取材：花生種子（浸泡取材：花生種子（浸泡h），去皮，將子葉削成薄片），去皮，將子葉削成薄片 制片：制片：選取最薄的薄片移至載玻片中央選取最薄的薄片移至載玻片中央在薄片上滴加在薄片上滴加蘇丹蘇丹

3、(或蘇丹或蘇丹)染液染液2 3滴，滴，染色染色min滴加體積分?jǐn)?shù)為滴加體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精的酒精溶液溶液12滴，洗滴，洗去浮色去浮色(多余的蘇丹多余的蘇丹)吸去余液，滴吸去余液，滴1-2滴蒸餾水，蓋上蓋玻片，制成滴蒸餾水，蓋上蓋玻片，制成臨時(shí)裝片臨時(shí)裝片顯微觀察：顯微觀察：先在低倍鏡下找到已著色的薄片，后用高倍鏡觀察先在低倍鏡下找到已著色的薄片，后用高倍鏡觀察現(xiàn)象：現(xiàn)象：有被染成有被染成橘黃色橘黃色(或紅色或紅色)的脂肪微粒的脂肪微粒脂肪微粒脂肪微粒脂肪的檢測(cè)結(jié)果脂肪的檢測(cè)結(jié)果3.蛋白質(zhì)的鑒定蛋白質(zhì)的鑒定 選材與制備選材與制備組織樣液：組織樣液：黃豆組織樣液（或雞蛋蛋清稀釋液）黃豆組織樣液（

4、或雞蛋蛋清稀釋液）黃豆浸泡黃豆浸泡 去皮去皮切片切片研磨研磨過濾過濾濾液濾液 顯顯色色反反應(yīng)應(yīng)mL組織樣液雙縮脲試劑mL現(xiàn)象：現(xiàn)象：無色無色雙縮脲試劑滴紫色或紫紅色紫色或紫紅色(創(chuàng)設(shè)堿性條件創(chuàng)設(shè)堿性條件)(提供提供Cu2+)蛋白質(zhì)的檢測(cè)結(jié)果蛋白質(zhì)的檢測(cè)結(jié)果4.淀粉的鑒定淀粉的鑒定取材：馬鈴薯勻漿取材：馬鈴薯勻漿檢測(cè)：檢測(cè)：mL組織樣液碘液碘液2滴滴現(xiàn)象：現(xiàn)象：搖勻后變成藍(lán)色搖勻后變成藍(lán)色問題探討問題探討:1、在做還原糖、蛋白質(zhì)鑒定的實(shí)驗(yàn)時(shí)，為什么要留出、在做還原糖、蛋白質(zhì)鑒定的實(shí)驗(yàn)時(shí)，為什么要留出一部分樣液？一部分樣液？作對(duì)照作對(duì)照2、使用雙縮脲試劑時(shí)為什么、使用雙縮脲試劑時(shí)為什么B液只能加液

5、只能加34滴而不能滴而不能過量？過量？過量的雙縮脲試劑過量的雙縮脲試劑B B會(huì)與試劑會(huì)與試劑A A反應(yīng)，使溶液呈藍(lán)色，反應(yīng)，使溶液呈藍(lán)色，而掩蓋生成的紫色。而掩蓋生成的紫色。3、為什么斐林試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用，不能放置太久？為什么斐林試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用，不能放置太久？時(shí)間太長(zhǎng)，時(shí)間太長(zhǎng)，Cu(OH)Cu(OH)2 2懸濁液就沉淀在試管底部而懸濁液就沉淀在試管底部而無法參與反應(yīng)。無法參與反應(yīng)。l深化深化4、斐林試劑與雙縮脲試劑兩者有何不同？、斐林試劑與雙縮脲試劑兩者有何不同？新配制新配制的的Cu(OH)2溶液溶液在堿性在堿性環(huán)境下環(huán)境下的的Cu2+NaOH濃度為濃度為0.1g/mLCuS04濃度為濃度為0

6、.05g/mLNaOH濃度為濃度為0.1g/mLCuS04濃度為濃度為0.01g/mL先把先把NaOH溶液和溶液和CuSO4溶液溶液混合混合，而后而后立即使用立即使用。先先加入加入Na0H1mL，然，然后后再加再加CuS044滴，搖勻。滴，搖勻。(不能過量不能過量)水浴水浴加熱加熱不不需需要要知識(shí)結(jié)構(gòu)1、青蘋果汁遇碘液顯藍(lán)色，熟蘋果汁能與斐林試劑青蘋果汁遇碘液顯藍(lán)色，熟蘋果汁能與斐林試劑作用產(chǎn)生磚紅色沉淀，下列結(jié)論中最合理的是作用產(chǎn)生磚紅色沉淀，下列結(jié)論中最合理的是()A青蘋果汁中有淀粉，不含還原糖青蘋果汁中有淀粉，不含還原糖 B熟蘋果汁中含還原糖，沒有淀粉熟蘋果汁中含還原糖，沒有淀粉 C蘋果

7、轉(zhuǎn)熟時(shí)，大量淀粉水解成還原糖蘋果轉(zhuǎn)熟時(shí)，大量淀粉水解成還原糖 D蘋果轉(zhuǎn)熟時(shí)單糖聚合成淀粉蘋果轉(zhuǎn)熟時(shí)單糖聚合成淀粉 Cl例題例題、安徽阜陽(yáng)劣質(zhì)奶粉事件震驚全國(guó)，引起世、安徽阜陽(yáng)劣質(zhì)奶粉事件震驚全國(guó)，引起世人注目。鑒定脫脂淡奶粉是否為偽劣產(chǎn)品，肯人注目。鑒定脫脂淡奶粉是否為偽劣產(chǎn)品，肯定不需要用到的化學(xué)試劑是定不需要用到的化學(xué)試劑是()A.斐林試劑斐林試劑 B.紅墨水紅墨水C.雙縮脲試劑雙縮脲試劑 D.蘇丹蘇丹染液染液 Bl例題例題3(2005.廣東廣東)生物組織中還原糖、脂肪和蛋白質(zhì)三種有機(jī)生物組織中還原糖、脂肪和蛋白質(zhì)三種有機(jī)物的鑒定實(shí)驗(yàn)中，以下操作錯(cuò)誤的是物的鑒定實(shí)驗(yàn)中，以下操作錯(cuò)誤的是()A、可溶性還原糖的鑒定，可用酒精燈直接加熱產(chǎn)生磚紅、可溶性還原糖的鑒定，可用酒精燈直接加熱產(chǎn)生磚紅色沉淀色沉淀B、只有脂肪的鑒定需要使用顯微鏡、只有脂肪的鑒定需要使用顯微鏡C、用雙縮脲試劑檢測(cè)蛋白質(zhì)不需要加熱、用雙縮脲試劑檢測(cè)蛋白質(zhì)不需要加熱D、使用斐林試劑和雙縮脲試劑最好是現(xiàn)配現(xiàn)用、使用斐林試劑和雙縮脲試劑最好是現(xiàn)配現(xiàn)用A