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1、檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì) 1.實驗原理 斐林試劑斐林試劑蘇丹蘇丹橘黃色橘黃色紅色紅色磚紅色沉淀磚紅色沉淀紫色紫色蘇丹蘇丹 雙縮脲試劑雙縮脲試劑鑒定物質(zhì)鑒定物質(zhì)試劑試劑實驗現(xiàn)象實驗現(xiàn)象還原性糖還原性糖脂肪脂肪蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)淀粉淀粉 碘液碘液 藍色藍色 生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定l實驗原理實驗原理選材：含糖量較高的選材：含糖量較高的白色或近于白色的植物組織白色或近于白色的植物組織(排除色素對排除色素對顯色的干擾顯色的干擾)，蘋果、梨最好，蘋果、梨最好。l實驗流程實驗流程(步驟步驟)1.可溶性還原糖可

2、溶性還原糖 制備組織樣液：制備組織樣液：制漿：去皮、切塊、研磨，制漿：去皮、切塊、研磨，過濾：（用單層紗布）過濾：（用單層紗布）取液：取液：（mL）顯色反應顯色反應 現(xiàn)象：現(xiàn)象：(用前混勻用前混勻)5065.C水浴水浴加熱加熱2min葡萄糖，果糖，葡萄糖，果糖，麥芽糖；麥芽糖；蔗糖為非還原蔗糖為非還原性糖性糖還原糖的檢測和觀察：還原糖的檢測和觀察：還原糖的檢測結果還原糖的檢測結果還原糖的檢測結果還原糖的檢測結果2.脂肪的鑒定脂肪的鑒定 取材：花生種子（浸泡取材：花生種子（浸泡h），去皮，將子葉削成薄片），去皮，將子葉削成薄片 制片：制片：選取最薄的薄片移至載玻片中央選取最薄的薄片移至載玻片中央

3、在薄片上滴加在薄片上滴加蘇丹蘇丹(或蘇丹或蘇丹)染液染液2 3滴，滴，染色染色min滴加體積分數(shù)為滴加體積分數(shù)為50%的酒精的酒精溶液溶液12滴，洗滴，洗去浮色去浮色(多余的蘇丹多余的蘇丹)吸去余液，滴吸去余液，滴1-2滴蒸餾水，蓋上蓋玻片，制成滴蒸餾水，蓋上蓋玻片，制成臨時裝片臨時裝片顯微觀察：顯微觀察：先在低倍鏡下找到已著色的薄片，后用高倍鏡觀察先在低倍鏡下找到已著色的薄片，后用高倍鏡觀察現(xiàn)象：現(xiàn)象：有被染成有被染成橘黃色橘黃色(或紅色或紅色)的脂肪微粒的脂肪微粒脂肪微粒脂肪微粒脂肪的檢測結果脂肪的檢測結果3.蛋白質(zhì)的鑒定蛋白質(zhì)的鑒定 選材與制備選材與制備組織樣液：組織樣液：黃豆組織樣液（

4、或雞蛋蛋清稀釋液）黃豆組織樣液（或雞蛋蛋清稀釋液）黃豆浸泡黃豆浸泡 去皮去皮切片切片研磨研磨過濾過濾濾液濾液 顯顯色色反反應應現(xiàn)象：現(xiàn)象：無色無色紫色或紫紅色紫色或紫紅色(創(chuàng)設堿性條件創(chuàng)設堿性條件)(提供提供Cu2+)蛋白質(zhì)的檢測結果蛋白質(zhì)的檢測結果4.淀粉的鑒定淀粉的鑒定取材：馬鈴薯勻漿取材：馬鈴薯勻漿檢測：檢測：碘液碘液2滴滴現(xiàn)象：現(xiàn)象：搖勻后變成藍色搖勻后變成藍色問題探討問題探討:1、在做還原糖、蛋白質(zhì)鑒定的實驗時，為什么要留出、在做還原糖、蛋白質(zhì)鑒定的實驗時，為什么要留出一部分樣液？一部分樣液？作對照作對照2、使用雙縮脲試劑時為什么、使用雙縮脲試劑時為什么B液只能加液只能加34滴而不能

5、滴而不能過量？過量？過量的雙縮脲試劑過量的雙縮脲試劑B B會與試劑會與試劑A A反應，使溶液呈藍色，反應，使溶液呈藍色，而掩蓋生成的紫色。而掩蓋生成的紫色。3、為什么斐林試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用，不能放置太久？為什么斐林試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用，不能放置太久？時間太長，時間太長，Cu(OH)Cu(OH)2 2懸濁液就沉淀在試管底部而懸濁液就沉淀在試管底部而無法參與反應。無法參與反應。l深化深化比比較項較項目目試劑試劑及成及成分分原理原理溶液溶液濃濃度度方法方法加加熱熱與否與否結結果果可溶可溶還還原糖的原糖的鑒鑒定定斐林斐林試劑試劑NaOHNaOH和和CuSOCuSO4 4磚磚紅紅色色沉沉淀淀蛋白蛋白質(zhì)質(zhì)的的鑒鑒定

6、定雙雙縮脲試縮脲試劑劑NaOHNaOH和和CuSOCuSO4 4溶溶液液呈呈紫紫色色4、斐林試劑與雙縮脲試劑兩者有何不同？、斐林試劑與雙縮脲試劑兩者有何不同？新配制新配制的的Cu(OH)2溶液溶液在堿性在堿性環(huán)境下環(huán)境下的的Cu2+NaOH濃度為濃度為0.1g/mLCuS04濃度為濃度為0.05g/mLNaOH濃度為濃度為0.1g/mLCuS04濃度為濃度為0.01g/mL先把先把NaOH溶液和溶液和CuSO4溶液溶液混合混合，而后而后立即使用立即使用。先先加入加入Na0H1mL，然，然后后再加再加CuS044滴，搖勻。滴，搖勻。(不能過量不能過量)水浴水浴加熱加熱不不需需要要知識結構1、青蘋果汁遇碘液顯藍色，熟蘋果汁能與斐林試劑青蘋果汁遇碘液顯藍色，熟蘋果汁能與斐林試劑作用產(chǎn)生磚紅色沉淀，下列結論中最合理的是作用產(chǎn)生磚紅色沉淀，下列結論中最合理的是()A青蘋果汁中有淀粉，不含還原糖青蘋果汁中有淀粉，不含還原糖 B熟蘋果汁中含還原糖，沒有淀粉熟蘋果汁中含還原糖，沒有淀粉 C蘋果轉熟時，大量淀粉水解成還原糖蘋果轉熟時，大量淀粉水解成還原糖 D蘋果轉熟時單糖聚合成淀粉蘋果轉熟時單糖聚合成淀粉 Cl例題例題