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1、實(shí)驗(yàn)生物組織中糖類脂肪和蛋白質(zhì)鑒定,思考題：,1、糖類、脂肪、蛋白質(zhì)鑒定的實(shí)驗(yàn)原理2、常見的還原糖有哪些？取材的要求3、斐林試劑的組成，使用時(shí)的注意事項(xiàng)4、雙縮脲試劑的組成，使用時(shí)注意事項(xiàng)5、斐林試劑和雙縮脲試劑的比較6、脂肪鑒定中酒精的用法和作用7、脂肪鑒定中能否直接觀察顏色？借助什么來觀察？8、如何鑒定淀粉，顏色反應(yīng)如何,1.實(shí)驗(yàn)原理：化學(xué)試劑+有機(jī)化合物特定的顏色,(1) 還原糖 + 斐林試劑 水浴加熱磚紅色 沉淀(2) 脂肪+蘇丹橘黃色 脂肪+蘇丹紅色(3) 蛋白質(zhì) + 雙縮脲試劑 紫色,2、常見的還原糖有哪些？取材的要求還原糖：可被氧化充當(dāng)還原劑的糖。(常見的有：葡萄糖、果糖、麥芽糖

2、、乳糖、半乳糖) 注意：蔗糖不是還原糖3、斐林試劑的組成，使用時(shí)注意事項(xiàng)斐林試劑：甲液：0.1g/mL的NaOH溶液 乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液使用注意事項(xiàng)：等量混合，現(xiàn)配現(xiàn)用（ NaOH+CuSO4）,1.點(diǎn)撥：還原糖 + 斐林試劑 磚紅色沉淀 可溶性還原糖與斐林試劑發(fā)生作用，可生成磚紅色的Cu2O沉淀。（放在盛有50-65溫水的大燒杯）,水浴加熱,顏色變化：淺藍(lán)色 棕色 磚紅色,1步驟：樣液制備:（取材5g，加入石英砂和 5ml水） (1)取樣液2ml于試管中 (2)加入新配制的斐林試劑1ml（甲液和乙液等量混合均勻后再加入）盛有50-65溫水的大燒杯） (3)水浴加熱2min

3、左右(（4）觀察顏色變化（淺藍(lán)色棕色磚紅色）,注意事項(xiàng)：（1）材料的選?。哼€原糖含量高，白色或近于白色，如蘋果梨白蘿卜。 思考：西瓜、甘蔗、甜菜可以嗎？為什么？（2）試劑：斐林試劑(等量混合、現(xiàn)配現(xiàn)用) 甲液：0.1g/mL的NaOH溶液 乙液：0.05g/ml的CuSO4溶液,4、雙縮脲試劑組成，使用時(shí)注意事項(xiàng),雙縮脲試劑組成：A液：0.1g/mL的NaOH溶液B液：0.01g/mL的CuSO4溶液,使用注意事項(xiàng)： 先加A液1mL于樣液中，再加B液4滴于樣液中,（1）蛋白質(zhì) + 雙縮脲試劑 紫色,2步驟：（1）試管中加樣液2mL（2）加雙縮脲試劑A液1mL（造成堿性環(huán) 境），搖勻（3）加雙縮

4、脲試劑B液4滴，搖勻（4）觀察顏色變化（紫色） 注：樣液濃度不宜過高，以免實(shí)驗(yàn)后黏住試管壁，洗不干凈。 B液不能過量，多余的B液會(huì)與A液反應(yīng)成藍(lán)色，而掩蓋生成的紫色。,5.比較斐林試劑和雙縮脲試劑,0.1g/mLNaOH,同甲液,0.01g/mLCuSO4,0.05g/mLCuSO4,還原性糖,蛋白質(zhì),等量混合后再加入,先加A液1mL，搖勻，再加B液4滴,50-65水浴加熱,磚紅色沉淀,紫色絡(luò)合物,不需加熱，搖勻,6、脂肪鑒定中酒精的用法和作用7、脂肪鑒定中能否直接觀察顏色？借助什么來觀察？,3.脂肪+蘇丹橘黃色 脂肪+蘇丹紅色,（2）步驟材料的選?。汉玖扛叩慕M織，如花生的子葉。取材： 取

5、一粒浸泡過的花生種子，去掉種皮切片制片：（切片越薄越好）將最薄的花生切片放在載玻片中央染色：滴23滴蘇丹染液，染色3min，用吸水紙吸去染液，再滴體積分?jǐn)?shù)50%的酒精洗去浮色，再用吸水紙吸去多余的酒精（蘇丹易溶于酒精中，避免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果），滴12滴清水于材料切片上蓋上蓋玻片鏡檢觀察：光學(xué)顯微鏡對(duì)光低倍鏡尋找著色圓形小顆粒高倍鏡觀察染成橘黃色的脂肪顆粒,8、如何鑒定淀粉，顏色反應(yīng)如何,用試管取2mL待測(cè)組織樣液，向試管內(nèi)滴加12滴碘液，觀察顏色變化。,4、淀粉 + 碘藍(lán)色,加12滴碘液,1.鑒定生物組織中可溶性還原糖的試劑 A斐林試劑 B雙縮脲試劑 C蘇丹染液 D蘇丹染液2.能與斐林試劑反應(yīng)產(chǎn)生

6、磚紅色沉淀的是A淀粉 B果糖C蔗糖D纖維素3.下列哪個(gè)實(shí)驗(yàn)用到顯微鏡（ ）A可溶性還原糖的鑒定 B蛋白質(zhì)的鑒定C脂肪的鑒定 D淀粉的鑒定,A,C,B,4.用斐林試劑鑒定可溶性還原糖時(shí)，溶液顏色的變化過程為（ ）A無色一磚紅色（沉淀）B淺藍(lán)色一磚紅色（沉淀）C淺藍(lán)色一藍(lán)色一磚紅色（沉淀）D淺藍(lán)色一棕色一磚紅色（沉淀）,5.下列物質(zhì)中，能被蘇丹IV染液染成紅色的是（ ）A馬鈴薯塊莖 B浸軟的蓖麻種子C蛋清液 D蘋果,D,B,6.還原糖的實(shí)驗(yàn)中，加入斐林試劑時(shí)必須要 A先加入斐林試劑甲液，后加入乙液B先加入斐林試劑乙液，后加入甲液C將斐林試劑的甲液和乙液混合均勻后再加D以上A、B、C三種操作方法都正

7、確7.鑒定蛋白質(zhì)樣品時(shí)加雙縮脲試劑正確做法是A先加A液，混合后再加B液搖勻觀察B先加B液，混合后再加A液搖勻觀察CA、B液混合后加入，搖勻后觀察DA、B液同時(shí)加入樣液，搖勻后觀察,C,A,即：還原糖中的醛基（CHO）被Cu(OH)2氧化， Cu(OH)2被還原成磚紅色的Cu2O沉淀,還原糖的鑒定原理：,5.比較斐林試劑和雙縮脲試劑,0.1g/mL的NaOH溶液,0.1g/mL的NaOH溶液,0.01g/mLCuSO4溶液,0.05g/mL的CuSO4溶液,還原性糖,蛋白質(zhì),甲液和乙液等量混合均勻后再加入,先加雙縮脲試劑A液1mL，搖勻，再加雙縮脲試劑B液4滴,50-65水浴加熱,磚紅色沉淀,紫色絡(luò)合物,不需加熱，搖勻即可,蛋白質(zhì)的鑒定原理：,蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑發(fā)生作用，產(chǎn)生紫色反應(yīng)。 蛋白質(zhì)分子中含有很多肽鍵，在堿性溶液（即A液可造成堿性環(huán)境）中能與雙縮脲試劑中的Cu2+作用，產(chǎn)生紫色絡(luò)合物。,