《糖類脂肪蛋白質(zhì)的檢測(cè)PPT課件.ppt》由會(huì)員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《糖類脂肪蛋白質(zhì)的檢測(cè)PPT課件.ppt（12頁(yè)珍藏版）》請(qǐng)?jiān)趨R文網(wǎng)上搜索。

1、實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理淀淀 粉粉還原糖還原糖(如如:葡萄糖、果糖、麥芽糖葡萄糖、果糖、麥芽糖)蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)脂脂 肪肪斐林試劑斐林試劑蘇丹蘇丹染液染液碘碘 液液雙縮脲試劑雙縮脲試劑橘黃色橘黃色紫色紫色藍(lán)色藍(lán)色水浴加熱水浴加熱水浴加熱水浴加熱試試 劑劑待檢有機(jī)物待檢有機(jī)物顏色變化顏色變化+磚紅色沉淀磚紅色沉淀蘇丹蘇丹染液染液紅色紅色一、還原糖的鑒定一、還原糖的鑒定可溶性可溶性還原糖還原糖+斐林試劑斐林試劑磚紅色沉淀磚紅色沉淀水浴水浴加熱加熱葡萄糖、果糖、麥芽糖是葡萄糖、果糖、麥芽糖是。蔗糖不是蔗糖不是在水浴加熱的條件下，還原糖和斐林試劑反應(yīng)，在水浴加熱的條件下，還原糖和斐林試劑反應(yīng)，生成磚紅色沉淀。生成

2、磚紅色沉淀。A:A:實(shí)驗(yàn)原理：實(shí)驗(yàn)原理：B:實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)步驟：選材：選材：含糖量高，含糖量高，顏色為白色或近于白色顏色為白色或近于白色。制備樣液：蘋果塊制備樣液：蘋果塊-研磨研磨-過(guò)濾過(guò)濾 水浴加熱水浴加熱蘋果汁蘋果汁注意：斐林試劑注意：斐林試劑不穩(wěn)定，一般配不穩(wěn)定，一般配成甲乙液，成甲乙液，現(xiàn)配現(xiàn)配現(xiàn)用現(xiàn)用，用時(shí)將甲，用時(shí)將甲乙兩液乙兩液等量混合等量混合后再加入樣液中后再加入樣液中 斐林試劑：斐林試劑：甲液甲液 0.1 g/ml的的NaOH溶液；溶液；乙液乙液 0.05 g/ml的的CuSO4溶液溶液蘋果汁蘋果汁斐林試劑斐林試劑顏色變化：淺藍(lán)色顏色變化：淺藍(lán)色-棕色棕色-磚紅色磚紅色設(shè)置對(duì)照

3、組1.1.怎樣配制斐林試劑？怎樣配制斐林試劑？用濃度為用濃度為 0.1g/ml NaOH(0.1g/ml NaOH(甲液甲液)與等量的與等量的0.05g/ml CuSO0.05g/ml CuSO4 4(乙液乙液)混合均勻而成。混合均勻而成。NaOH +CuSO4 Cu(OH)2 藍(lán)色沉淀藍(lán)色沉淀 +Cu(OH)2+還原糖還原糖 Cu 2 O 磚紅色沉淀磚紅色沉淀 +問(wèn)題思問(wèn)題思考考2.2.為什么斐林試劑可檢驗(yàn)還原糖的存在？為什么斐林試劑可檢驗(yàn)還原糖的存在？斐林試劑的本質(zhì)是斐林試劑的本質(zhì)是Cu(OH)Cu(OH)2 2 的懸濁液，還原糖的懸濁液，還原糖把把 Cu(OH)Cu(OH)2 2 還原成

4、還原成Cu Cu 2 2 O O 沉淀。沉淀。3.3.為什么要用新配制的試劑？為什么要用新配制的試劑？因?yàn)殪沉衷噭┓€(wěn)定性較差，要因?yàn)殪沉衷噭┓€(wěn)定性較差，要現(xiàn)用現(xiàn)配，混合使用現(xiàn)用現(xiàn)配，混合使用。二、脂肪的鑒定二、脂肪的鑒定A:實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理:脂肪脂肪+蘇丹蘇丹III染液染液橘黃色橘黃色脂肪脂肪+蘇丹蘇丹IV染液染液紅色紅色 B:實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)步驟 選材選材:花生種子最好花生種子最好,浸泡浸泡.制備樣品制備樣品:花生去皮花生去皮-切薄片切薄片.鑒定鑒定:花生切片花生切片d 顯微鏡觀察顯微鏡觀察c 制片制片b 50%酒精漂洗酒精漂洗a 蘇丹蘇丹III染色染色實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象:脂肪脂肪+蘇丹蘇丹III

5、染液染液橘黃色橘黃色脂肪脂肪+蘇丹蘇丹IV染液染液紅色紅色顯微鏡顯微鏡三三 、蛋白質(zhì)的鑒定蛋白質(zhì)的鑒定A:實(shí)驗(yàn)原理：實(shí)驗(yàn)原理：蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)+雙縮脲試劑雙縮脲試劑 紫色反應(yīng)紫色反應(yīng)B:B:實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)步驟:選擇選擇:大豆豆?jié){或雞蛋蛋白大豆豆?jié){或雞蛋蛋白(稀釋稀釋),),鮮肝提取液鮮肝提取液.制備樣液制備樣液:大豆大豆-研磨研磨-過(guò)濾過(guò)濾 鑒定步驟鑒定步驟:豆?jié){豆?jié){b b 再加雙縮脲試劑再加雙縮脲試劑B B液液a a 先加雙縮脲試劑先加雙縮脲試劑A A液液0.1 g/ml0.1 g/ml的的NaOHNaOH溶液溶液,先先為實(shí)驗(yàn)制造堿性環(huán)境為實(shí)驗(yàn)制造堿性環(huán)境.0.01 g/ml的的CuSO4溶液溶液

6、蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑發(fā)生作用，產(chǎn)生紫色反應(yīng)蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑發(fā)生作用，產(chǎn)生紫色反應(yīng) B B液要求量適中，否則液要求量適中，否則多余的多余的B B液液將會(huì)將會(huì)與與A A液液發(fā)生反應(yīng)生發(fā)生反應(yīng)生成成Cu(OH)Cu(OH)2 2顯色而遮蓋原有的顏色。顯色而遮蓋原有的顏色。鑒定前，留出一部分組織樣液，以便鑒定前，留出一部分組織樣液，以便對(duì)比對(duì)比用于蛋白質(zhì)鑒定的用于蛋白質(zhì)鑒定的蛋清必須稀釋蛋清必須稀釋，以免實(shí)驗(yàn)后粘住試管，以免實(shí)驗(yàn)后粘住試管壁，不易洗刷壁，不易洗刷斐林試劑與雙縮脲試劑比較斐林試劑與雙縮脲試劑比較原理不同：原理不同：斐林試劑的實(shí)質(zhì)是新配制的斐林試劑的實(shí)質(zhì)是新配制的Cu(OH)2溶液；溶液；雙縮脲試劑實(shí)質(zhì)是堿性環(huán)境中的雙縮脲試劑實(shí)質(zhì)是堿性環(huán)境中的Cu2+。