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1、分分子子生生物物學(xué)學(xué)2010實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室常用分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室常用儀器設(shè)備簡(jiǎn)介及操作儀器設(shè)備簡(jiǎn)介及操作實(shí)驗(yàn)一實(shí)驗(yàn)一 1 1分分子子生生物物學(xué)學(xué)2010實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室主要儀器，設(shè)備的簡(jiǎn)介及使用方法實(shí)驗(yàn)室主要儀器，設(shè)備的簡(jiǎn)介及使用方法 微量移液器微量移液器 高速臺(tái)式離心機(jī)高速臺(tái)式離心機(jī) PCRPCR儀儀 凝膠成像系統(tǒng)凝膠成像系統(tǒng) 電泳儀電泳儀 恒溫氣浴搖床恒溫氣浴搖床 超凈工作臺(tái)超凈工作臺(tái) 滅菌鍋滅菌鍋2 2分分子子生生物物學(xué)學(xué)2010實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)微量移液器微量移液器3 3分分子子生生物物學(xué)學(xué)2010實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn) 微量移液器是連續(xù)可調(diào)的、計(jì)量和轉(zhuǎn)移液體的專用儀微量移液器是連續(xù)可調(diào)的、計(jì)量和轉(zhuǎn)移液

2、體的專用儀器，其裝有直接讀數(shù)容量計(jì)。器，其裝有直接讀數(shù)容量計(jì)。微量移液器有多種規(guī)格，在移液器量程范圍內(nèi)能連續(xù)微量移液器有多種規(guī)格，在移液器量程范圍內(nèi)能連續(xù)調(diào)節(jié)讀數(shù)。調(diào)節(jié)讀數(shù)。0.5 0.510l 10l 10 10100l100l 20 20200l 200l 100 1001000l1000l常見規(guī)格常見規(guī)格4 4分分子子生生物物學(xué)學(xué)2010實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)量液的操作步驟：量液的操作步驟：第一停點(diǎn)第二停點(diǎn)A A 保持微量移液器垂直，將按鈕壓至第一停點(diǎn)；保持微量移液器垂直，將按鈕壓至第一停點(diǎn)；B B 微量移液器頭尖端浸入溶液，緩慢釋放按鈕；微量移液器頭尖端浸入溶液，緩慢釋放按鈕；C C 保持微量移液器

3、垂直，將微量移液器頭與容器壁接觸，慢保持微量移液器垂直，將微量移液器頭與容器壁接觸，慢 慢壓下按鈕至第一停點(diǎn)；慢壓下按鈕至第一停點(diǎn)；D D 壓至第二停點(diǎn)把溶液完全釋放出；壓至第二停點(diǎn)把溶液完全釋放出；E E 釋放按鈕回原狀。釋放按鈕回原狀。5 5分分子子生生物物學(xué)學(xué)2010實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn) 1 1 1 1 未裝吸嘴的微量移液器絕對(duì)不可用來(lái)吸取任何液體。未裝吸嘴的微量移液器絕對(duì)不可用來(lái)吸取任何液體。未裝吸嘴的微量移液器絕對(duì)不可用來(lái)吸取任何液體。未裝吸嘴的微量移液器絕對(duì)不可用來(lái)吸取任何液體。2 2 2 2 一定要在允許量程范圍內(nèi)設(shè)定容量，千萬(wàn)不要將讀一定要在允許量程范圍內(nèi)設(shè)定容量，千萬(wàn)不要將讀一定要在允許

4、量程范圍內(nèi)設(shè)定容量，千萬(wàn)不要將讀一定要在允許量程范圍內(nèi)設(shè)定容量，千萬(wàn)不要將讀 數(shù)的調(diào)節(jié)超出其適用的刻度范圍，否則會(huì)造成損壞。數(shù)的調(diào)節(jié)超出其適用的刻度范圍，否則會(huì)造成損壞。數(shù)的調(diào)節(jié)超出其適用的刻度范圍，否則會(huì)造成損壞。數(shù)的調(diào)節(jié)超出其適用的刻度范圍，否則會(huì)造成損壞。3 3 3 3 不要橫放或倒拿帶有殘余液體吸嘴的移液器。不要橫放或倒拿帶有殘余液體吸嘴的移液器。不要橫放或倒拿帶有殘余液體吸嘴的移液器。不要橫放或倒拿帶有殘余液體吸嘴的移液器。4 4 4 4 不要用大量程的移液器移取小體積樣品。不要用大量程的移液器移取小體積樣品。不要用大量程的移液器移取小體積樣品。不要用大量程的移液器移取小體積樣品。5

5、.5.5.5.移液器使用完后，將刻度調(diào)到最大刻度，收藏。移液器使用完后，將刻度調(diào)到最大刻度，收藏。移液器使用完后，將刻度調(diào)到最大刻度，收藏。移液器使用完后，將刻度調(diào)到最大刻度，收藏。量液操作注意問(wèn)題：量液操作注意問(wèn)題：量液操作注意問(wèn)題：量液操作注意問(wèn)題：6 6分分子子生生物物學(xué)學(xué)2010實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)臺(tái)式高速離心機(jī)臺(tái)式高速離心機(jī)離心機(jī)的分類離心機(jī)的分類低速低速：每分鐘幾千轉(zhuǎn)：每分鐘幾千轉(zhuǎn)高速高速：每分鐘：每分鐘13萬(wàn)轉(zhuǎn)萬(wàn)轉(zhuǎn)超速超速：每分鐘：每分鐘3萬(wàn)轉(zhuǎn)以上萬(wàn)轉(zhuǎn)以上7 7分分子子生生物物學(xué)學(xué)2010實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)低速：細(xì)胞等大分子低速：細(xì)胞等大分子 高速：高速：DNADNA，蛋白等，蛋白等 超速超速:病毒，

6、蛋白，細(xì)胞器等病毒，蛋白，細(xì)胞器等基因片段的分離、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物樣品基因片段的分離、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物樣品的分離制備實(shí)驗(yàn)中都離不開低溫離心技術(shù)的分離制備實(shí)驗(yàn)中都離不開低溫離心技術(shù) 本實(shí)驗(yàn)室所用離心機(jī)本實(shí)驗(yàn)室所用離心機(jī):臺(tái)式高速離心機(jī)（臺(tái)式高速離心機(jī)（ThermoThermo ），配有），配有角式轉(zhuǎn)頭：角式轉(zhuǎn)頭：241.5ml241.5ml；極限轉(zhuǎn)速；極限轉(zhuǎn)速13000rpm;13000rpm;臺(tái)式低溫高速離臺(tái)式低溫高速離心機(jī)（心機(jī)（sigma),sigma),極限轉(zhuǎn)速極限轉(zhuǎn)速20000rpm20000rpm。離心機(jī)的功能：離心機(jī)的功能：分離，純化分離，純化8 8分分

7、子子生生物物學(xué)學(xué)2010實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)1 1 1 1、把離心機(jī)放置于平面桌或平面臺(tái)上，檢查離心機(jī)是否、把離心機(jī)放置于平面桌或平面臺(tái)上，檢查離心機(jī)是否、把離心機(jī)放置于平面桌或平面臺(tái)上，檢查離心機(jī)是否、把離心機(jī)放置于平面桌或平面臺(tái)上，檢查離心機(jī)是否 放置平穩(wěn)。放置平穩(wěn)。放置平穩(wěn)。放置平穩(wěn)。2 2 2 2、將離心管對(duì)稱放入轉(zhuǎn)子內(nèi)，且要、將離心管對(duì)稱放入轉(zhuǎn)子內(nèi)，且要、將離心管對(duì)稱放入轉(zhuǎn)子內(nèi)，且要、將離心管對(duì)稱放入轉(zhuǎn)子內(nèi)，且要事先平衡事先平衡事先平衡事先平衡。3 3 3 3、鎖緊門蓋。、鎖緊門蓋。、鎖緊門蓋。、鎖緊門蓋。4 4 4 4、插上電源插座，按下電源開關(guān)。、插上電源插座，按下電源開關(guān)。、插上電源插座，

8、按下電源開關(guān)。、插上電源插座，按下電源開關(guān)。5 5 5 5、設(shè)置轉(zhuǎn)子號(hào)、轉(zhuǎn)速、時(shí)間：、設(shè)置轉(zhuǎn)子號(hào)、轉(zhuǎn)速、時(shí)間：、設(shè)置轉(zhuǎn)子號(hào)、轉(zhuǎn)速、時(shí)間：、設(shè)置轉(zhuǎn)子號(hào)、轉(zhuǎn)速、時(shí)間：（常用，最高轉(zhuǎn)速為（常用，最高轉(zhuǎn)速為（常用，最高轉(zhuǎn)速為（常用，最高轉(zhuǎn)速為13000r/min13000r/min13000r/min13000r/min，時(shí)間最長(zhǎng)為，時(shí)間最長(zhǎng)為，時(shí)間最長(zhǎng)為，時(shí)間最長(zhǎng)為20min20min20min20min）；）；）；）；注意注意注意注意：對(duì)應(yīng)的轉(zhuǎn)子不可超速使用，否則對(duì)試管或轉(zhuǎn)子有損壞。：對(duì)應(yīng)的轉(zhuǎn)子不可超速使用，否則對(duì)試管或轉(zhuǎn)子有損壞。：對(duì)應(yīng)的轉(zhuǎn)子不可超速使用，否則對(duì)試管或轉(zhuǎn)子有損壞。：對(duì)應(yīng)的轉(zhuǎn)子不可

9、超速使用，否則對(duì)試管或轉(zhuǎn)子有損壞。6 6 6 6、當(dāng)轉(zhuǎn)子停轉(zhuǎn)后，打開門蓋取出離心管，關(guān)斷電源開關(guān)。、當(dāng)轉(zhuǎn)子停轉(zhuǎn)后，打開門蓋取出離心管，關(guān)斷電源開關(guān)。、當(dāng)轉(zhuǎn)子停轉(zhuǎn)后，打開門蓋取出離心管，關(guān)斷電源開關(guān)。、當(dāng)轉(zhuǎn)子停轉(zhuǎn)后，打開門蓋取出離心管，關(guān)斷電源開關(guān)。臺(tái)式高速離心機(jī)使用步驟臺(tái)式高速離心機(jī)使用步驟9 9分分子子生生物物學(xué)學(xué)2010實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)：1 1 1 1、離心機(jī)在運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)，不得移動(dòng)離心機(jī)，不要打開門蓋。、離心機(jī)在運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)，不得移動(dòng)離心機(jī)，不要打開門蓋。、離心機(jī)在運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)，不得移動(dòng)離心機(jī)，不要打開門蓋。、離心機(jī)在運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)，不得移動(dòng)離心機(jī)，不要打開門蓋。2 2 2 2、安放離心機(jī)

10、的臺(tái)面應(yīng)堅(jiān)實(shí)平整，四只橡膠機(jī)腳都應(yīng)與、安放離心機(jī)的臺(tái)面應(yīng)堅(jiān)實(shí)平整，四只橡膠機(jī)腳都應(yīng)與、安放離心機(jī)的臺(tái)面應(yīng)堅(jiān)實(shí)平整，四只橡膠機(jī)腳都應(yīng)與、安放離心機(jī)的臺(tái)面應(yīng)堅(jiān)實(shí)平整，四只橡膠機(jī)腳都應(yīng)與臺(tái)面接觸和均勻受力，以免產(chǎn)生振動(dòng)。臺(tái)面接觸和均勻受力，以免產(chǎn)生振動(dòng)。臺(tái)面接觸和均勻受力，以免產(chǎn)生振動(dòng)。臺(tái)面接觸和均勻受力，以免產(chǎn)生振動(dòng)。3 3 3 3、離心管加液要平衡，若加液差異過(guò)大運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)會(huì)產(chǎn)生大、離心管加液要平衡，若加液差異過(guò)大運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)會(huì)產(chǎn)生大、離心管加液要平衡，若加液差異過(guò)大運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)會(huì)產(chǎn)生大、離心管加液要平衡，若加液差異過(guò)大運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)會(huì)產(chǎn)生大的振動(dòng)，此時(shí)應(yīng)停機(jī)檢查，使加液符合要求，離心試管必的振動(dòng)，此時(shí)應(yīng)停機(jī)檢查，使加

11、液符合要求，離心試管必的振動(dòng)，此時(shí)應(yīng)停機(jī)檢查，使加液符合要求，離心試管必的振動(dòng)，此時(shí)應(yīng)停機(jī)檢查，使加液符合要求，離心試管必須對(duì)稱放入。須對(duì)稱放入。須對(duì)稱放入。須對(duì)稱放入。4 4 4 4、若運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)有離心試管破裂，會(huì)引起較大振動(dòng)應(yīng)立即停、若運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)有離心試管破裂，會(huì)引起較大振動(dòng)應(yīng)立即停、若運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)有離心試管破裂，會(huì)引起較大振動(dòng)應(yīng)立即停、若運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)有離心試管破裂，會(huì)引起較大振動(dòng)應(yīng)立即停機(jī)處理。機(jī)處理。機(jī)處理。機(jī)處理。5 5 5 5、離心機(jī)徹底停止后，才可開蓋，取樣。、離心機(jī)徹底停止后，才可開蓋，取樣。、離心機(jī)徹底停止后，才可開蓋，取樣。、離心機(jī)徹底停止后，才可開蓋，取樣。1010分分子子生生物物學(xué)學(xué)201

12、0實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)PCR儀儀1111分分子子生生物物學(xué)學(xué)2010實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)PCR儀主要應(yīng)用于基礎(chǔ)研究和應(yīng)用研究等許多領(lǐng)域，儀主要應(yīng)用于基礎(chǔ)研究和應(yīng)用研究等許多領(lǐng)域，如基因分析、序列分析、進(jìn)化分析、臨床診斷、法醫(yī)如基因分析、序列分析、進(jìn)化分析、臨床診斷、法醫(yī)學(xué)等。學(xué)等。PCR儀，也稱儀，也稱DNA熱循環(huán)儀、基因擴(kuò)增儀，能使熱循環(huán)儀、基因擴(kuò)增儀，能使一對(duì)寡核苷酸引物結(jié)合到正負(fù)一對(duì)寡核苷酸引物結(jié)合到正負(fù)DNA鏈上的靶序列兩鏈上的靶序列兩側(cè)，從而酶促合成拷貝數(shù)為百萬(wàn)倍的靶序列側(cè)，從而酶促合成拷貝數(shù)為百萬(wàn)倍的靶序列DNA片片段，它的每一循環(huán)包括段，它的每一循環(huán)包括DNA變性、復(fù)性、延伸變性、復(fù)性、延伸三個(gè)三個(gè)反應(yīng)

13、。反應(yīng)。1212分分子子生生物物學(xué)學(xué)2010實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)操作程序操作程序:1 1）開機(jī)：打開電源，顯示主界面；）開機(jī)：打開電源，顯示主界面；2 2）創(chuàng)建程序：使用）創(chuàng)建程序：使用”createcreate”輸入新程序（包括輸入新程序（包括PCRPCR循循 環(huán)數(shù)，預(yù)變性、變性、復(fù)性、延伸的時(shí)間和溫環(huán)數(shù)，預(yù)變性、變性、復(fù)性、延伸的時(shí)間和溫 度），保存程序（包括用戶名和方法名）度），保存程序（包括用戶名和方法名）;3 3）放入樣品，蓋上蓋子）放入樣品，蓋上蓋子;4 4）在所建用戶名下按）在所建用戶名下按“run”run”鍵，找到設(shè)定的程序，鍵，找到設(shè)定的程序，按按“startstart”鍵鍵啟動(dòng)程序啟動(dòng)

14、程序;5 5）運(yùn)行結(jié)束后按）運(yùn)行結(jié)束后按“stopstop”鍵停止運(yùn)行，取出樣品，關(guān)鍵停止運(yùn)行，取出樣品，關(guān)閉電源。閉電源。1313分分子子生生物物學(xué)學(xué)2010實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)1 1、預(yù)變性：可用、預(yù)變性：可用、預(yù)變性：可用、預(yù)變性：可用94949595，2 210min,10min,一般用一般用一般用一般用 5min5min。2 2、變性：一般用、變性：一般用、變性：一般用、變性：一般用9494，30s2min,30s2min,一般一般一般一般45s1min45s1min。3 3、退火：溫度自定，、退火：溫度自定，、退火：溫度自定，、退火：溫度自定，30s2min30s2min。4 4、延伸：、延伸

15、：、延伸：、延伸：7272，對(duì)于，對(duì)于，對(duì)于，對(duì)于(1kb=1min,(1kb=1min,每增加每增加每增加每增加1kb1kb加加加加1min)1min)。5 5、循環(huán)數(shù)：一般、循環(huán)數(shù)：一般、循環(huán)數(shù)：一般、循環(huán)數(shù)：一般25253535個(gè)循環(huán)個(gè)循環(huán)個(gè)循環(huán)個(gè)循環(huán)(2,3,4(2,3,4步循環(huán)）。步循環(huán)）。步循環(huán)）。步循環(huán)）。6 6、最終延伸：、最終延伸：、最終延伸：、最終延伸：7272，5 515min15min。7 7、保存：、保存：、保存：、保存：4 4，時(shí)間設(shè)為，時(shí)間設(shè)為，時(shí)間設(shè)為，時(shí)間設(shè)為0 0。8 8、ENDEND。如何設(shè)置一個(gè)如何設(shè)置一個(gè)如何設(shè)置一個(gè)如何設(shè)置一個(gè)PCRPCR程序：程序：

16、程序：程序：1414分分子子生生物物學(xué)學(xué)2010實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)FR-980生物生物電電泳泳圖圖像分析系像分析系統(tǒng)統(tǒng)1515分分子子生生物物學(xué)學(xué)2010實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)系統(tǒng)簡(jiǎn)介：系統(tǒng)簡(jiǎn)介：系統(tǒng)可以通過(guò)紫外系統(tǒng)可以通過(guò)紫外/可見光分析裝置及透光掃描儀直可見光分析裝置及透光掃描儀直接獲得核酸、蛋白質(zhì)凝膠電泳圖像。系統(tǒng)配置有接獲得核酸、蛋白質(zhì)凝膠電泳圖像。系統(tǒng)配置有SmartViewSmartView生物電泳圖像分析軟件，可以進(jìn)行密度掃描、生物電泳圖像分析軟件，可以進(jìn)行密度掃描、密度定量、分子量計(jì)算等電泳分析。此外，該系統(tǒng)含有密度定量、分子量計(jì)算等電泳分析。此外，該系統(tǒng)含有多種圖像濾波器，可降低圖像的噪音，從而獲得較清晰多種圖像濾波器，可降低圖像的噪音，從而獲得較清晰的圖像。的圖像。1616分分子子生生物物學(xué)學(xué)2010實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)操作步驟：操作步驟：1）將電泳樣品放入分析裝置中將電泳樣品放入分析裝置中2）打開電腦，運(yùn)行打開電腦，運(yùn)行SmartView軟件，單擊軟件，單擊“Import”鍵進(jìn)入鍵進(jìn)入圖像獲取項(xiàng)目欄，圖像獲取項(xiàng)目欄，選擇選擇“獲取視頻圖像獲取視頻圖像”鍵，進(jìn)鍵，進(jìn)行圖像采集行圖像采集3）選選擇紫外或