分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室儀器操作簡(jiǎn)介ppt課件.ppt
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1、1. 微量移液器,微量移液器有數(shù)字可調(diào)式和固定式兩種型號(hào),是計(jì)量和轉(zhuǎn)移液體的專用儀器,其裝有直接讀數(shù)容量計(jì)。 微量移液器有多種規(guī)格,在移液器量程范圍內(nèi)能連續(xù)調(diào)節(jié)讀數(shù)。,量液的操作步驟:,第一停點(diǎn),第二停點(diǎn),A 保持微量移液器垂直,將按鈕壓至第一停點(diǎn);B 微量移液器頭尖端浸入溶液,緩慢釋放按鈕;C 保持微量移液器垂直,將微量移液器頭與容器壁接觸,慢 慢壓下按鈕至第一停點(diǎn);D 壓至第二停點(diǎn)把溶液完全釋放出;E 釋放按鈕回原狀。,1 未裝吸嘴的微量移液器絕對(duì)不可用來吸取任何液體。 2 一定要在允許量程范圍內(nèi)設(shè)定容量,千萬不要將讀 數(shù)的調(diào)節(jié)超出其適用的刻度范圍,否則會(huì)造成損壞。 3 不要橫放或倒拿帶有
2、殘余液體吸嘴的移液器。 4 不要用大量程的移液器移取小體積樣品。 5. 移液器使用完后,將刻度調(diào)到最大刻度,收藏。,量液操作注意問題:,2. 臺(tái)式高速離心機(jī),離心機(jī)的分類 低速:每分鐘幾千轉(zhuǎn) 高速:每分鐘1 3萬轉(zhuǎn) 超速:每分鐘3萬轉(zhuǎn)以上,低速:細(xì)胞等大分子 高速:DNA,蛋白等 超速:病毒,蛋白,細(xì)胞器等基因片段的分離、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物樣品的分離制備實(shí)驗(yàn)中都離不開低溫離心技術(shù),離心機(jī)的功能:分離 純化,1、把離心機(jī)放置于平面桌或平面臺(tái)上,檢查離心機(jī)是否 放置平穩(wěn)。2、將離心管對(duì)稱放入轉(zhuǎn)子內(nèi),且要事先平衡。3、鎖緊門蓋。4、插上電源插座,按下電源開關(guān)。5、設(shè)置轉(zhuǎn)子號(hào)、轉(zhuǎn)速、時(shí)間.
3、 注意:對(duì)應(yīng)的轉(zhuǎn)子不可超速使用,否則對(duì)試管或轉(zhuǎn)子有損壞。6、當(dāng)轉(zhuǎn)子停轉(zhuǎn)后,打開門蓋取出離心管,關(guān)斷電源開關(guān)。,臺(tái)式高速離心機(jī)使用步驟,注意事項(xiàng):1、離心機(jī)在運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí),不得移動(dòng)離心機(jī),不要打開門蓋。2、安放離心機(jī)的臺(tái)面應(yīng)堅(jiān)實(shí)平整,四只橡膠機(jī)腳都應(yīng)與臺(tái)面接觸和均勻受力,以免產(chǎn)生振動(dòng)。3、離心管加液要平衡,若加液差異過大運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)會(huì)產(chǎn)生大的振動(dòng),此時(shí)應(yīng)停機(jī)檢查,使加液符合要求,離心試管必須對(duì)稱放入。4、若運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)有離心試管破裂,會(huì)引起較大振動(dòng)應(yīng)立即停機(jī)處理。5、離心機(jī)徹底停止后,才可開蓋,取樣。,低溫冷凍離心機(jī),1.把離心機(jī)水平安放于地面2.使用前開機(jī)預(yù)冷3.對(duì)應(yīng)轉(zhuǎn)子重量要平衡4.按操作規(guī)程操作,3. PC
4、R儀,PCR儀主要應(yīng)用于基礎(chǔ)研究和應(yīng)用研究等許多領(lǐng)域,如基因分析、序列分析、進(jìn)化分析、臨床診斷、法醫(yī)學(xué)等。,PCR儀,也稱DNA熱循環(huán)儀、基因擴(kuò)增儀,能使一對(duì)寡核苷酸引物結(jié)合到正負(fù)DNA鏈上的靶序列兩側(cè),從而酶促合成拷貝數(shù)為百萬倍的靶序列DNA片段,它的每一循環(huán)包括DNA變性、復(fù)性、延伸三個(gè)反應(yīng)。,操作程序:,1)開機(jī):打開電源,顯示主界面;2)創(chuàng)建程序:使用”create”輸入新程序(包括PCR循 環(huán)數(shù),預(yù)變性、變性、復(fù)性、延伸的時(shí)間和溫 度),保存程序(包括用戶名和方法名);3)放入樣品,蓋上蓋子;4)在所建用戶名下按“run”鍵,找到設(shè)定的程序, 按“start”鍵啟動(dòng)程序;5)運(yùn)行結(jié)束
5、后按“stop”鍵停止運(yùn)行,取出樣品,關(guān)閉電源。,1、預(yù)變性:可用9495,210min,一般用 5min。 2、變性:一般用94,30s2min,一般45s1min。 3、退火:溫度自定,30s2min。 4、延伸:72,對(duì)于(1kb=1min,每增加1kb加1min)。 5、循環(huán)數(shù):一般2535個(gè)循環(huán)(2,3,4步循環(huán))。 6、最終延伸:72,515min。 7、保存:4,時(shí)間設(shè)為0-60min。 8、END。,如何設(shè)置PCR程序:,4. 電泳圖像分析系統(tǒng),系統(tǒng)簡(jiǎn)介:,系統(tǒng)可以通過紫外/可見光分析裝置及透光掃描儀直接獲得核酸、蛋白質(zhì)凝膠電泳圖像。系統(tǒng)配置有SmartView生物電泳圖像分析
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