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1、分子生物學技術(shù)在病原微生物檢驗中的應用 摘要:目的:對分子生物學技術(shù)在臨床常見病原微生物快速檢測中的應用進行分析。方法:抽取在2000年至2010年這幾年時間里分子生物學技術(shù)在臨床中的應用情況的調(diào)查資料,對分子生物學技術(shù)對常見病原微生物進行快速檢測的應用情況進行回顧性分析。結(jié)果:分子生物學技術(shù)在最近幾年得到了飛速的發(fā)展,主要包括聚合酶鏈反應技術(shù)、基因芯片技術(shù)、生物傳感器技術(shù)。結(jié)論:在病原體診斷分析方面分子生物學技術(shù)以其獨特的優(yōu)勢越來越發(fā)揮著重要的作用。 關(guān)鍵詞:分子生物學技術(shù); 常見病原微生物; 基因芯片; 傳感器 【中圖分類號】Q789【文獻標識碼】A【文章編號】1672-3783(2013
2、)11-0115-02 在食品工業(yè)、水質(zhì)環(huán)境質(zhì)量監(jiān)控以及對臨床疾病進行診斷等眾多領域中對病原微生物進行檢測得到了廣泛的應用。最近幾年以來,病原微生物的檢測工作已經(jīng)變成世界各國所關(guān)注的焦點。過去傳統(tǒng)標準的檢測方法主要是以病原菌的分離、培養(yǎng)以及表型的鑒定為基礎,由于傳統(tǒng)方法具有整個檢測周期長,操作步驟繁瑣, 容易受標本環(huán)境等缺點從而對檢測的特異性以及靈敏度產(chǎn)生了很大的影響。目前, 分子生物學技術(shù)主要以PCR 技術(shù)、生物芯片以及傳感器為代表在對微生物進行診斷中得到了不斷的發(fā)展, 以上這些方法的優(yōu)點主要有以下幾點:簡便、快速、特異、敏感、自動化程度高, 能夠?qū)ΜF(xiàn)在臨床對于病原微生物檢測的需求予以滿足。
3、在本次研究中對抽取的2000年至2010年這幾年時間里分子生物學技術(shù)在臨床中的應用情況的調(diào)查資料,就其分子生物學技術(shù)對常見病原微生物進行快速檢測的應用情況進行回顧性分析。以下為本次研究的結(jié)果報告。 1資料與方法 1.1一般資料:采用隨機抽樣的方法抽取在2000年至2010年這幾年時間里分子生物學技術(shù)在臨床中的應用情況的調(diào)查資料,調(diào)查的主要內(nèi)容包括新技術(shù)的開發(fā),新技術(shù)在臨床上的應用情況,新技術(shù)的優(yōu)點以及新技術(shù)的原理等。以上所調(diào)查的所有內(nèi)容不存在統(tǒng)計學差異,可以在分析中予以應用。 1.2方法:對所抽取的分子生物學技術(shù)在臨床中的應用情況的調(diào)查資料回顧性分析,對分子生物學技術(shù)的原理、特點以及應用情況進
4、行統(tǒng)計總結(jié)。 1.3數(shù)據(jù)處理:在本次研究過程中所得到的所有相關(guān)數(shù)據(jù),均采用SPSS14.0統(tǒng)計學數(shù)據(jù)處理軟件進行處理分析,當P0.05時,我們認為數(shù)據(jù)之間有明顯的統(tǒng)計學差異。 2結(jié)果 在最近幾年分子生物學技術(shù)得到了飛速的發(fā)展,最新開發(fā)的幾項新技術(shù)主要包括聚合酶鏈反應技術(shù)、基因芯片技術(shù)、生物傳感器技術(shù)。三種技術(shù)各有各的優(yōu)點,在臨床上對常見病原微生物進行快速檢測各具特點,給臨床上對原微生物進行快速檢測提供了很大的方便。 3討論 聚合酶鏈反應技術(shù)(PCR):自PCR 技術(shù)在1985年建立到2010年這一段時間里,該技術(shù)的發(fā)展十分的迅速, 應用也在日趨多元化,由PCR技術(shù)而衍生出很多種相關(guān)技術(shù)在最近幾
5、年同樣受到臨床對病原體的診斷與檢測工作的廣泛歡迎。由PCR技術(shù)而衍生的其他技術(shù)主要有:多重PCR 技術(shù)、實時熒光定量PCR 技術(shù)、等溫擴增技術(shù)等。所謂的多重PCR就是指在普通PCR 基礎上得到不斷發(fā)展的,在一個PCR體系里增加多余兩對引物,并且會將多個核酸片段予以擴增的一個PCR反應, 該技術(shù)的做用為對多種病原微生物能夠同時進行檢測或者是鑒定分型。而所謂的實時熒光定量PCR就是將熒光基團加入到PCR反應的體系中,通過對熒光信號的積累積累對整個PCR進程進行實時監(jiān)測, 最后對未知模板利用標準曲線進行定量分析一種技術(shù)。最近幾年以來出現(xiàn)了核酸恒溫擴增技術(shù), 這是對儀器以及實驗室條件的要求得到了簡化、并且使檢測時間有效縮短,這已經(jīng)成為核酸擴增技術(shù)的發(fā)展方向。 基因芯片技術(shù): 生物芯片技術(shù)是將生物大分子,如寡核苷酸、基因組DNA、肽、抗原以及抗體等固定在諸如硅片、玻璃片、塑料片、凝膠和尼龍膜等固相介質(zhì)上形成生物分子點陣,當待測樣品中的生物分子與生物芯片的探針分子發(fā)生雜交或相互作用后,利用激光共聚焦顯微掃描儀對雜交信號進行檢測和分析。微生物檢測基因芯片是指用來檢測樣品中是否含有微生物目的核酸片段的芯片?;诟咄?、微型化和平行分析的特點,微生物檢測基因芯片在微生物病原體檢測、種類鑒定、功能基因檢測、基因分型、突變檢測、基因組監(jiān)測等研究領域中發(fā)揮著越來越重要的作用。