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1、專題三 胚胎工程3.1 體內(nèi)受精和早期胚胎發(fā)育1、精子的發(fā)生場所：睪丸時間：從初情期開始，到生殖機能衰退過程：1精原細(xì)胞多個初級精母細(xì)胞通過數(shù)次有絲分裂21個初級精母細(xì)胞2個次級精母細(xì)胞4個精子細(xì)胞通過減數(shù)分裂，即MI和MII3精子細(xì)胞精子通過變形細(xì)胞核變成精子頭的主要局部；高爾基體發(fā)育成頭部的頂體；中心體演變成精子的尾；線粒體集中在尾的基部形成線粒體鞘；細(xì)胞內(nèi)的其他物質(zhì)濃縮為球狀，叫做原生質(zhì)滴，最后脫落2、卵子的發(fā)生場所：卵巢、輸卵管時間：性別分化以后胎兒時期完成了卵泡的形成和在卵巢內(nèi)的儲藏，從初情期開始，到生殖機能衰退過程：1卵原細(xì)胞初級卵母細(xì)胞21個初級卵母細(xì)胞1個次級卵母細(xì)胞第一極體排

2、卵前后完成31個次級卵母細(xì)胞1個卵子第二極體精子和卵子結(jié)合過程中完成3、受精概念：精子和卵子結(jié)合成合子受精卵的過程。場所：雌性的輸卵管內(nèi)過程：1受精前的準(zhǔn)備階段1：精子獲能2受精前的準(zhǔn)備階段2：卵子的準(zhǔn)備M中期3受精階段：a.精子穿越放射冠：頂體反響頂體酶b.精子穿越透明帶：透明帶反響阻止多精入卵的第一道屏障c.進(jìn)入卵黃膜：卵黃膜封閉作用阻止多精入卵的第二道屏障d.原核形成雄原核的體積略大于雌原核e.配子結(jié)合完成標(biāo)志：透明帶與卵黃膜的間隙可以觀察到兩個極體4、早期胚胎發(fā)育場所：輸卵管、子宮卵裂期：細(xì)胞在透明帶中進(jìn)行有絲分裂，數(shù)量增加，胚胎總體積不增加桑椹胚：胚胎細(xì)胞達(dá)32個左右，每一個細(xì)胞都是

3、細(xì)胞囊胚：有囊胚腔，出現(xiàn)了囊胚從透明帶中伸展出來的孵化過程細(xì)胞開始分化的時期原腸胚：內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞形成外胚層和內(nèi)胚層、中胚層，滋養(yǎng)層發(fā)育成胎膜和胎盤，內(nèi)胚層包圍著原腸腔“一腔三層3.2 體外受精和早期胚胎培養(yǎng)1、試管動物技術(shù)：通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精，并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植產(chǎn)生后代的技術(shù)。有性生殖過程2、卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)方法一：用促性腺激素處理，使其超數(shù)排卵，從中輸卵管沖取卵子針對實驗動物，家畜豬、羊等方法二：從屠宰母畜卵巢中采集方法三：借助超聲波探測儀、內(nèi)窺鏡、腹腔鏡等工具直接從活體母畜卵巢中吸取針對大家畜或大型動物，如牛3、精子的采集和獲能采集的方法：

4、假陰道法、手握法和電刺激法獲能的方法：培養(yǎng)法通過獲能培養(yǎng)液：對于嚙齒目動物、家兔和豬等動物化學(xué)誘導(dǎo)法通過肝素或鈣離子載體A23187：對于牛、羊等家畜。4、體外受精 獲能溶液或?qū)Ｓ玫氖芫芤菏芫韩@能的精子 培養(yǎng)成熟的卵子 完成受精5、胚胎早期培養(yǎng)條件：受精卵在發(fā)育培養(yǎng)液中培養(yǎng)培養(yǎng)液成分：無機鹽、有機鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等不同動物胚胎移植的時間不同：牛、羊一般要培養(yǎng)到桑椹胚或囊胚階段，人的胚胎到816個細(xì)胞階段移植。6、畫出試管牛工業(yè)化生產(chǎn)的技術(shù)流程圖3.3 胚胎工程的應(yīng)用及前景1、胚胎移植1概念：是指將雌性動物的早期胚胎，或者通過體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、

5、生理狀態(tài)相同的其他雌性動物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術(shù)。其中提供胚胎的個體叫供體，接受胚胎的個體叫受體。2地位：胚胎移植是轉(zhuǎn)基因、核移植、或體外受精等技術(shù)的最后一道“工序3現(xiàn)狀：在牛的胚胎移植中，技術(shù)方法更為簡便、實用。4意義：加速育種工作和品種改進(jìn) 大量節(jié)省購置種畜的費用；一胎多產(chǎn)；保存品種資源和瀕危物種；可充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體繁殖潛力。供體主要職能只是產(chǎn)生優(yōu)良特性的胚胎，縮短繁殖周期；受體的主要任務(wù)是妊娠和育仔。5生理學(xué)根底：供、受體生殖器官的生理變化相同，為胚胎提供相同的生理環(huán)境早期胚胎沒有與母體子宮建立組織聯(lián)系，為胚胎收集提供可能受體對外來胚胎根本不發(fā)生免疫排斥反響，為胚胎的存活

6、提供可能胚胎能與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系但其遺傳物質(zhì)不受影響6根本程序：供、受體的選擇和處理超數(shù)排卵配種或人工受精胚胎收集沖卵胚胎的檢查、培養(yǎng)胚胎發(fā)育到桑椹胚或囊胚或保存196的液氮胚胎移植：手術(shù)法引出子宮和卵巢將其注入；非手術(shù)法用移植管將其送入子宮妊娠檢查分娩2、胚胎分割動物無性繁殖或克隆1概念：指采用機械方法將早期胚胎切割成2、4或8等份等，經(jīng)移植獲得同卵雙胎或多胎的技術(shù)。2儀器設(shè)備：實體顯微鏡和顯微操作儀3操作程序：選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚，移入盛有操作液的培養(yǎng)皿 用分割針或分割刀切開胚胎，吸出半個，注入空透明帶或直接將裸半胚移植給受體。分割囊胚時要將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割

7、。此時還可用分割針分割滋養(yǎng)層，做胚胎DNA分析性別鑒定。(3)考前須知：對囊胚階段的胚胎進(jìn)行分割時，要將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割。胚胎分割的份數(shù)越多，操作的難度會越大，移植的成功率也越低。4局限：剛出生的動物體重偏低，毛色和斑紋上存在差異，同卵多胎的可能性有限。3、胚胎干細(xì)胞1概念：由早期胚胎或原始性腺中別離出來的一類細(xì)胞。簡稱ES或EK細(xì)胞。2形態(tài)上：體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯3功能上：具有發(fā)育的全能性，即可分化為成年動物體任何一種組織細(xì)胞；在體外可增殖而不發(fā)生分化；可冷凍保存；可進(jìn)行遺傳改造 4應(yīng)用：冷凍保存或遺傳改造 治療人類的某些頑癥，人類由于細(xì)胞壞死、退化或功能異常引起的疾病，如帕金森綜合癥、少年糖尿病和老年癡呆癥等，已成為醫(yī)學(xué)上尚未攻克的頑癥。培育出人造組織器官，用于器官移植ES細(xì)胞也是研究體外細(xì)胞分化的理想材料。