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1、(完整word版)專題2課題1微生物的實驗室培養(yǎng)導學案班級：_ _ 組 姓名_ 教師評價_專題 2課題1微生物的實驗室培養(yǎng)【課程標準】具體內(nèi)容標準:進行微生物的分離和培養(yǎng)活動建議： 用大腸桿菌為材料進行平面培養(yǎng)，分離菌落【學習目標】知識目標：1。舉例說明有關培養(yǎng)基的基礎知識2.概述無菌操作技術包括的主要內(nèi)容能力目標：掌握純化大腸桿菌的基本操作【學習重難點】重點：說出有關培養(yǎng)基的基礎知識 難點：微生物培養(yǎng)中的有關實驗操作【自主探究案】一、基礎知識 （一)培養(yǎng)基1。按照配置成的狀態(tài),培養(yǎng)基的種類包括 培養(yǎng)基和 培養(yǎng)基等。2.培養(yǎng)基的化學成分一般都含有 、 、 、 四類營養(yǎng)成分。3。在提供上述幾種主

2、要營養(yǎng)物質(zhì)的基礎上,培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對 、 _ 以及 等的要求.例如:培養(yǎng)乳酸桿菌時需要在培養(yǎng)基中添加 ；培養(yǎng)霉菌時需要將培養(yǎng)基的PH調(diào)至 ;培養(yǎng)細菌時需要將培養(yǎng)基的PH調(diào)至 ;培養(yǎng)厭氧微生物時需要提供_的條件。（二）無菌技術1.獲得純凈培養(yǎng)物的關鍵是 。避免雜菌污染的方法主要包括以下四個內(nèi)容：對實驗操作的 、操作者的衣著和手進行清潔和 .將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進行 。 為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操作應在_附近進行。 實驗操作時應避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與_相接觸。 2.消毒和滅菌(1）消毒是指使用_僅殺死物體表面或_的部分微生物（不包括_和_)。常

3、用的消毒方法有 、 。此外,人們也常使用化學藥劑進行消毒，如用 、 等.此外,實驗室里還用 進行消毒。（2）滅菌是指使用強烈的理化因素殺死物體_的微生物，包括芽孢和孢子。常用的滅菌方法有 、 、 ，二、實驗操作： 1.制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基 倒平板，往往在滅菌前還需要_2.純化大腸桿菌微生物接種的方法中最常用的是 和 。（1）平板劃線法是指接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面_的操作，將聚集的菌種_到培養(yǎng)基的表面。（2)稀釋涂布平板法是指將菌液進行一系列的_，然后將不同_的菌液分別涂布在瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)。在稀釋度 的菌液時，聚集在一起的微生物將被分散成_，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的_

4、，它在生態(tài)學上屬于什么單位？_。三、結果分析與評價1.如果接種大腸桿菌的培養(yǎng)基上生長的菌落顏色形狀大小基本一致,說明接種符合要求。2。若培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落，則說明接種過程中_未達到要求。3。_（作為對照的培養(yǎng)基），在培養(yǎng)過程中出現(xiàn)了菌落，則說明培養(yǎng)基_不徹底,實驗失敗.四、菌種的保存1.對于頻繁使用的菌種，我們可以采用 法;利用固體斜面培養(yǎng)基培養(yǎng)后，保 存在4冰箱中，每36個月轉種培養(yǎng)一次,缺點_。2。對于需要長期保存的菌種，可以采用 法；溫度為_?！竞献魈骄堪浮刻骄恳?消毒與滅菌1、無菌技術除了防止培養(yǎng)物被污染外,還具有的目的是什么？2、利用干熱滅菌箱對玻璃器皿滅菌時物品不能擺得太擠，目

5、的是什么？3、在制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的稱量操作中,動作要迅速，原因是什么？4、溶化操作中需要不斷用玻璃棒攪拌的目的是什么？探究二：有關“倒平板”操作1。培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到500C左右，才能用來倒平板。你用什么方法來估計培養(yǎng)基的溫度？2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？3。平板冷凝后,為什么要將平板倒置？4.在倒平板的過程中,如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎?為什么？探究三:有關“平板劃線法”操作1. 為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結束時，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？2.在灼燒接種環(huán)之后,為什么要等其冷卻后再

6、進行劃線?3。在作第二次以及其后的劃線操作是為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線?探究四：有關“稀釋涂布平板法”操作1、 涂布平板的所有操作都應在火焰附近進行，結合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求，想一想，涂布平板操作的第2步應如何進行無菌操作？2、培養(yǎng)12h和24h后的菌落大小?菌落分布位置？原因？3、在某培養(yǎng)基上出現(xiàn)了3種特征不同的菌落是什么原因？【鞏固提高案】1.下列措施中不屬于消毒的是（ ）A。酒精擦拭雙手 B。向水中通入少量Cl2 C。皮膚受傷處涂紫藥水 D.灼燒接種環(huán)2。有關平板劃線操作的敘述，正確的是（ ）A.使用已滅菌的接種環(huán)、培養(yǎng)皿，操作過程中不再滅菌B。打開含菌種的試管需通

7、過火焰滅菌,取出菌種后需馬上塞上棉塞C。把皿蓋打開，將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線即可D。最后將平板倒置，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3。下列有關平板劃線接種法的操作錯誤的是（ ）A。將接種環(huán)放在火焰上燃燒 B。將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液 C。蘸取菌液和劃線要在火焰旁進行 D。 接種環(huán)劃線要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)的劃線相連4。關于制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的敘述錯誤的是（ )A。操作順序為計算、稱量、溶化、倒平板、滅菌 B。將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯C。等培養(yǎng)基冷卻至500C左右時進行倒平板 D。將平板冷卻凝固5-10分鐘后將平板倒過來放置5.細菌培養(yǎng)過程分別采

8、用了高壓蒸汽、酒精、火焰灼燒等幾種不同的處理，這些方法依次用于殺滅哪些部位的雜菌( )A. 接種環(huán)、手、培養(yǎng)基 B.高壓鍋、手、接種環(huán) C。培養(yǎng)基、手、接種環(huán) D。接種環(huán)、手、高壓鍋6。有關稀釋涂布平板法的敘述錯誤的是（)A.首先將菌液進行一系列的梯度稀釋 B。然后將不同稀釋度的菌液分別涂布在瓊脂固體培養(yǎng)基的表面C.適宜條件下培養(yǎng) D.結果都可在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落7.為了保持菌種的純凈需要進行菌種的保藏，下列有關敘述不正確的是（）A.對于頻繁使用的菌種，可以采用臨時保藏的方法 B.臨時保藏的菌種一般接種到試管的斜面培養(yǎng)基上 C.臨時保藏的菌種容易被污染或產(chǎn)生變異 D.對于需要長期保存的菌

9、種，可以采用低溫-40C保藏的方法8。(1）在大腸桿菌培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外,還要考慮、和滲透壓等條件。（2）在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行 處理（消毒、滅菌），其中對培養(yǎng)皿進行滅菌常用的方法是；操作者的雙手需要進行清洗。（3)若用稀釋涂布平板法計數(shù)大腸桿菌活菌的個數(shù)，要想使所得估計值更接近實際值，除應嚴格操作、多次重復外，還應保證待測樣品稀釋的。（4）通常，對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對細菌進行初步的.（5)培養(yǎng)大腸桿菌時,在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應采用的檢測方法是 。(6）若用大腸桿菌進行實驗，使用過的培養(yǎng)

10、基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴散。9。炭疽病是由炭疽桿菌引起的一種人畜共患傳染病。炭疽桿菌兩端截平、呈竹節(jié)狀排列，菌落呈卷發(fā)狀.對炭疽病疑似患者，可根據(jù)噬菌體的宿主專一性,通過實驗確診。（1)細菌培養(yǎng)：采集疑似患者的樣本,分離培養(yǎng),獲得可疑菌落。（2)細菌鑒定:實驗流程如下圖所示.對配制的液體培養(yǎng)基等需采取 方法滅菌；實驗所用液體培養(yǎng)基的碳源為 (填“無機碳”或“有機碳”）。挑選可疑菌落制片后，用 觀察，可看到呈竹節(jié)狀排列的桿菌.接種可疑菌后，35培養(yǎng)24小時，液體培養(yǎng)基變渾濁,原因是 。對照組試管中應加入 ，與實驗組同時培養(yǎng)6小時后，若實驗組液體培養(yǎng)基的渾濁度比對照組

11、（填“高”或“低”），則可明確疑似患者被炭疽桿菌感染;反之則排除。對排除的疑似患者及易感人群，可接種炭疽桿菌疫苗，刺激機體產(chǎn)生相應抗體,與產(chǎn)生抗體相關的細胞除T細胞、B細胞外,還有 。專題 2課題1微生物的實驗室培養(yǎng)導學案答案：【自主探究案】一、（一）1、液體 固體 2、水 碳源 氮源 無機鹽 3、PH 特殊營養(yǎng)物質(zhì) 氧氣 維生素 酸性 中性或微堿性 無氧（二）1、防止外來雜菌的污染 空間 消毒 滅菌 酒精燈火焰 周圍的物品 2。較為溫和的物理或化學方法 內(nèi)部 芽孢 孢子 煮沸消毒法 巴氏消毒法 酒精擦拭雙手 氯氣消毒水源 紫外線 內(nèi)外所有 灼燒滅菌 干熱滅菌 高壓蒸汽滅菌 二、1、計算稱量溶化滅菌 調(diào)PH2、平板劃線法 稀釋涂布平板法 連續(xù)劃線 逐步稀釋分散 梯度稀釋 稀釋度 足夠高 單個細胞 菌落 種群 三、 無菌操作 未接種的培養(yǎng)基 滅菌四、臨時保藏 保存時間較短，容易發(fā)生污染和變異 甘油管藏 20【合作探究案】一、1、防止感染實驗操作者 。2、避免妨礙熱空氣流