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1、本章內(nèi)容本章內(nèi)容第一節(jié)第一節(jié)概概述述第二節(jié)第二節(jié)理化性質(zhì)理化性質(zhì)第三節(jié)第三節(jié)提取與分離提取與分離第四節(jié)第四節(jié)結(jié)構(gòu)測定結(jié)構(gòu)測定一、基本結(jié)構(gòu)與分類一、基本結(jié)構(gòu)與分類（一）黃酮類化合物的基本結(jié)構(gòu)（一）黃酮類化合物的基本結(jié)構(gòu)色原酮色原酮2-2-苯基色原酮苯基色原酮黃酮類化合物是泛指黃酮類化合物是泛指兩個兩個具有酚具有酚羥基的羥基的苯環(huán)苯環(huán)（A-與與B-環(huán)）通過環(huán)）通過中央三中央三碳原子碳原子相互連接而成的一系列化合物。相互連接而成的一系列化合物。定義定義:2 2黃酮醇類（黃酮醇類（flavonolflavonol）槲皮素槲皮素R=H 蘆丁蘆丁 R=蕓香糖基蕓香糖基 以以2-2-苯基色原酮為基本母核，苯

2、基色原酮為基本母核，C C3有有含氧取代基。含氧取代基。3 3二氫黃酮類（二氫黃酮類（flavanonesflavanones）二氫黃酮二氫黃酮 橙皮苷橙皮苷 4 4二氫黃酮醇類（二氫黃酮醇類（flavanonolsflavanonols）二氫槲皮素二氫槲皮素二氫黃酮醇二氫黃酮醇5 5異黃酮類（異黃酮類（isoflavonesisoflavones）其其B環(huán)連接在環(huán)連接在C3位上。位上。大豆素大豆素R=H 大豆苷大豆苷R=glc 6 6查耳酮類（查耳酮類（chalconeschalcones）兩苯環(huán)之間的兩苯環(huán)之間的三碳鏈為開鏈結(jié)構(gòu)三碳鏈為開鏈結(jié)構(gòu) 查耳酮查耳酮 紅花苷紅花苷7 7花色素類花色

3、素類 又稱花青又稱花青素，是一類素，是一類水溶性色素水溶性色素，多以多以苷苷的形式存在。的形式存在。矢車菊素矢車菊素花色素花色素8 8黃烷黃烷-3-3-醇類醇類 又稱兒茶素類化合物又稱兒茶素類化合物（）（）兒茶素兒茶素 黃烷醇黃烷醇 9 9橙橙酮類酮類 橙橙酮酮硫磺菊素硫磺菊素（三（三)組成黃酮苷的糖類組成黃酮苷的糖類 單糖類：單糖類：D-葡萄糖、葡萄糖、D-半乳糖、半乳糖、D-木糖、木糖、L-鼠李糖、鼠李糖、L-L-阿拉伯糖、阿拉伯糖、D-D-葡萄糖醛酸等。葡萄糖醛酸等。?；穷悾乎；穷悾?-乙酸葡萄糖等。乙酸葡萄糖等。三糖類：三糖類：龍膽三糖、槐三糖等。龍膽三糖、槐三糖等。雙糖類：雙糖類

4、：槐糖、蕓香糖、龍膽二糖等。槐糖、蕓香糖、龍膽二糖等。二、黃酮類化合物的生物活性（自學(xué)）二、黃酮類化合物的生物活性（自學(xué)）（一）對心血管系統(tǒng)的作用（一）對心血管系統(tǒng)的作用（二）抗肝臟毒作用（二）抗肝臟毒作用（三）抗炎作用（三）抗炎作用（四）雌性激素樣作用（四）雌性激素樣作用（五）抗菌及抗病毒作用（五）抗菌及抗病毒作用（六）瀉下作用（六）瀉下作用（七）解痙作用（七）解痙作用第二節(jié)第二節(jié) 黃酮類的理化性質(zhì)及顯色反應(yīng)黃酮類的理化性質(zhì)及顯色反應(yīng) 一、性一、性狀狀多為結(jié)晶性固體，多為結(jié)晶性固體，少數(shù)苷為無定形粉末。少數(shù)苷為無定形粉末。2旋光性旋光性 游離的苷元游離的苷元中中二氫黃酮（醇）、二氫黃酮（醇）

5、、黃烷黃烷(醇醇)（），其余則無光學(xué)活性。其余則無光學(xué)活性。1晶形晶形 苷類苷類（），且多為（），且多為左旋左旋。3顏色顏色 黃酮、黃酮醇及其苷類黃酮、黃酮醇及其苷類灰黃灰黃黃色黃色查耳酮查耳酮黃黃橙黃色橙黃色，二氫黃酮、二氫黃酮醇二氫黃酮、二氫黃酮醇不顯色不顯色異黃酮異黃酮顯微黃色微黃色 黃酮（醇）分子中，尤其在黃酮（醇）分子中，尤其在 7-位及位及 4-位引入位引入-OH及及-OCH3等助色團(tuán)后，而等助色團(tuán)后，而使化合物的使化合物的顏色加深。顏色加深?；ㄉ丶捌滠赵念伾S花色素及其苷元的顏色隨pH不同而改變不同而改變 一般顯一般顯紅紅（pH 7）紫紫（pH8.5）藍(lán)藍(lán)（pH8.5）等顏色

6、）等顏色 二、溶二、溶解解性性1苷與苷元苷與苷元 游離苷元：游離苷元：苷類：苷類：2苷元苷元黃酮、黃酮醇、查耳酮等黃酮、黃酮醇、查耳酮等更難溶于水更難溶于水平面性強(qiáng)的分子，因分子與分子間平面性強(qiáng)的分子，因分子與分子間排排列緊密列緊密，分子間，分子間引力較大。引力較大。二氫黃酮及二氫黃酮醇等二氫黃酮及二氫黃酮醇等溶解度稍大溶解度稍大因系因系非平面性非平面性分子，故分子與分子分子，故分子與分子間間排列不緊密排列不緊密，分子間引力降低，有利，分子間引力降低，有利于水分子進(jìn)入，于水分子進(jìn)入，溶解度稍大。溶解度稍大。R=H，二氫黃酮，二氫黃酮R=OH，二氫黃酮醇，二氫黃酮醇花色苷元（花青素）類花色苷元（

7、花青素）類水溶度較大水溶度較大雖也為平面性結(jié)構(gòu)，但因以雖也為平面性結(jié)構(gòu)，但因以離子離子形式形式存在，具有存在，具有鹽的通性鹽的通性，故親水性，故親水性較強(qiáng)。較強(qiáng)?；ㄇ嗨鼗ㄇ嗨?3 3苷類苷類苷元相同時，羥基糖越多，糖分子苷元相同時，羥基糖越多，糖分子越多，水溶度越大。越多，水溶度越大。同一苷元，同一苷元，3-O-葡萄糖苷葡萄糖苷的水溶度的水溶度7-O-葡萄糖苷葡萄糖苷 三、酸性與堿性三、酸性與堿性（一）酸性（一）酸性黃酮黃酮酚羥基酸性強(qiáng)弱順序依次為：酚羥基酸性強(qiáng)弱順序依次為：7,4-7,4-二二OHOH7-7-或或4-OH4-OH一般酚羥基一般酚羥基5-5-OHOH應(yīng)用應(yīng)用:用于提取、分離及鑒

8、定工作用于提取、分離及鑒定工作（二）堿性（二）堿性強(qiáng)酸下形成洋鹽強(qiáng)酸下形成洋鹽 -吡喃環(huán)上的吡喃環(huán)上的1-氧原子氧原子，因有未共用，因有未共用的電子對，故表現(xiàn)的電子對，故表現(xiàn)微弱的堿性微弱的堿性，可與強(qiáng)無，可與強(qiáng)無機(jī)酸生成鹽，但生成的鹽極不穩(wěn)定，加水機(jī)酸生成鹽，但生成的鹽極不穩(wěn)定，加水后即可分解。后即可分解。四、呈色反應(yīng)四、呈色反應(yīng)（一）還原試驗（一）還原試驗鑒別鑒別1鹽酸鹽酸-鎂粉（或鋅粉）反應(yīng)鎂粉（或鋅粉）反應(yīng) 黃酮（醇）黃酮（醇）橙紅橙紅紫紅色紫紅色二氫黃酮（醇）二氫黃酮（醇）查耳酮、橙酮、兒茶素查耳酮、橙酮、兒茶素（-）異黃酮類除少數(shù)例外，也不顯色異黃酮類除少數(shù)例外，也不顯色操作：操作

9、：樣品樣品/乙醇中加入少許鎂粉振搖，滴加乙醇中加入少許鎂粉振搖，滴加 幾滴濃幾滴濃HClHCl，即可顯色。，即可顯色。排除干擾排除干擾：先作空白對照實驗先作空白對照實驗Mg粉粉2 2四氫硼鈉反應(yīng)四氫硼鈉反應(yīng)區(qū)別區(qū)別二氫黃酮二氫黃酮類類上述四種黃酮上述四種黃酮HCl無色無色紅色紅色二氫黃酮類二氫黃酮類/EtOH2NaBH4/MeOH濃濃HCl 紅紅紫色紫色（二）金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)（二）金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)C3-OH，C5-OH，鄰二，鄰二OH（+）絡(luò)合應(yīng)具備的條件絡(luò)合應(yīng)具備的條件 結(jié)果：結(jié)果：顏色，沉淀顏色，沉淀用途：用途：鑒定，結(jié)構(gòu)測定，提取分離鑒定，結(jié)構(gòu)測定，提取分離1.鋁鹽鋁鹽 1A

10、lCl3溶液，絡(luò)合物多為溶液，絡(luò)合物多為黃色，黃色，為為顯色劑和比色測定。顯色劑和比色測定。2.鉛鹽鉛鹽 常用常用1醋酸鉛醋酸鉛及及堿式醋酸鉛堿式醋酸鉛水溶液水溶液，可生成可生成沉淀沉淀。應(yīng)用：應(yīng)用：鑒定、提取及分離工作。鑒定、提取及分離工作。3ZrOCl2（鋯鹽）（鋯鹽）5-OH黃酮類黃酮類3-OH2%枸櫞酸枸櫞酸 黃黃（3-OH3-OH黃酮黃酮）褪色（褪色（5-OH5-OH黃酮）黃酮）2%ZrOCl2黃黃甲醇甲醇3-OH3-OH，4-4-酮基酮基絡(luò)合物穩(wěn)定性絡(luò)合物穩(wěn)定性5 5OHOH，4-4-酮基酮基絡(luò)合物絡(luò)合物原因：原因：4鎂鹽鎂鹽 鑒別兩類二氫黃酮鑒別兩類二氫黃酮 二氫黃酮二氫黃酮Mg

11、(Ac)2 2二氫黃酮醇二氫黃酮醇天藍(lán)色天藍(lán)色熒光熒光噴灑噴灑黃酮、黃酮醇及異黃酮黃酮、黃酮醇及異黃酮 顯顯黃色黃色橙黃色橙黃色褐色褐色 5.氯化鍶（氯化鍶（SrCl2）鑒別鑒別鄰二鄰二OH具鄰二酚鄰二酚OHOH黃酮黃酮類/氨性甲醇氨性甲醇 綠色綠色棕色棕色乃至乃至黑色黑色（三）硼酸顯色反應(yīng)（三）硼酸顯色反應(yīng)具具5 5OHOH 的黃酮的黃酮 2 2OHOH查耳酮查耳酮硼酸硼酸（四）堿性試劑顯色反應(yīng)（四）堿性試劑顯色反應(yīng) 在日光及紫外光下，通過紙斑反應(yīng)，觀在日光及紫外光下，通過紙斑反應(yīng)，觀察樣品用堿性試劑處理后的顏色變化情況，察樣品用堿性試劑處理后的顏色變化情況，對于鑒別黃酮類化合物有一定意義。

12、對于鑒別黃酮類化合物有一定意義。亮黃色亮黃色酸性液酸性液 第三節(jié)第三節(jié) 黃酮類化合物的提取與分離黃酮類化合物的提取與分離 一、提一、提取取存在形式存在形式：花、葉、果等組織中花、葉、果等組織中苷苷木部堅硬組織中木部堅硬組織中游離苷元游離苷元選擇溶劑：選擇溶劑：黃酮苷黃酮苷，極性稍大的苷元極性稍大的苷元丙酮、丙酮、醋酸乙酯、乙醇、水、醋酸乙酯、乙醇、水、甲醇甲醇-水（水（1：1）、甲醇）、甲醇花青素類花青素類可加少量酸（如可加少量酸（如 0.l鹽酸）鹽酸）黃酮苷元黃酮苷元宜用極性較小的溶劑宜用極性較小的溶劑（氯仿、乙醚、醋酸乙酯）等提?。确隆⒁颐?、醋酸乙酯）等提取多糖苷類多糖苷類沸水提取沸水提

13、取對對得得到到的的粗粗提提取取物物可可進(jìn)進(jìn)行行精精制制處處理理，常用的方法有：常用的方法有：（一）溶劑萃取法（一）溶劑萃取法1醇浸液、去脂雜醇浸液、去脂雜加加p.e水提取去水雜水提取去水雜加加多倍量高度多倍量高度醇醇（二）堿提取酸沉淀法（二）堿提取酸沉淀法適合酸性成分適合酸性成分具有具有Ar-OH的黃酮的黃酮藥材藥材堿水液堿水液 H+OH-沉淀沉淀（黃酮苷，苷元）（黃酮苷，苷元）水水（水雜，水雜，M+）（三）炭粉吸附法（三）炭粉吸附法適于適于苷苷類的精制類的精制甲醇粗提液甲醇粗提液活性炭活性炭 黃酮黃酮活性炭活性炭 沸水沸水 沸甲醇沸甲醇 7酚酚/水水 15%酚酚/醇醇（四）（四）樹脂吸附提取

14、法樹脂吸附提取法適于適于苷苷類的精制類的精制 二、分二、分離離分離黃酮的依據(jù)分離黃酮的依據(jù)：（1 1）極性大小不同）極性大小不同吸附吸附層析層析（2 2）分配比不同）分配比不同分配分配層析層析（3 3）酸性不同）酸性不同pH梯度萃取法梯度萃取法（4）MW大小不同大小不同葡聚糖凝膠分子篩葡聚糖凝膠分子篩 或膜技或膜技術(shù)術(shù) （5 5）官能團(tuán)）官能團(tuán)絡(luò)合，沉淀等絡(luò)合，沉淀等（一）柱色譜法（一）柱色譜法1硅膠柱色譜硅膠柱色譜 適于分離異黃酮、二氫黃酮（醇）及適于分離異黃酮、二氫黃酮（醇）及高度甲基化（或乙醚化）的黃酮（醇）類高度甲基化（或乙醚化）的黃酮（醇）類 常用的分離方法有常用的分離方法有柱層析法

15、柱層析法、萃取法萃取法、鉛鹽法鉛鹽法、HPLCHPLC法、法、薄層層析法薄層層析法等。等。常用的吸附劑或載體有硅膠、聚酰胺及纖維常用的吸附劑或載體有硅膠、聚酰胺及纖維素粉等。也有用氧化鋁、氧化鎂及硅藻土等。素粉等。也有用氧化鋁、氧化鎂及硅藻土等。（1）分離對象）分離對象：酚、醌、硝基化合物酚、醌、硝基化合物2 2聚酰胺柱色譜聚酰胺柱色譜（2 2）原）原 理：理：氫鍵吸附氫鍵吸附（3）影響因素：）影響因素：黃酮類分子中黃酮類分子中羥基的數(shù)目羥基的數(shù)目與與位置位置 溶劑與黃酮類溶劑與黃酮類溶劑與聚酰胺溶劑與聚酰胺之間形成之間形成氫鍵締合氫鍵締合能力的大小能力的大?。?）洗脫規(guī)律）洗脫規(guī)律（先（先后

16、順序）后順序）叁糖苷叁糖苷雙糖苷雙糖苷單糖苷單糖苷苷元苷元 苷元相同：苷元相同：-OH位置位置：C=O 鄰位鄰位-OH黃酮黃酮C=O對位對位（或間位）間位）-OH黃酮黃酮 -OH多少多少：酚羥基少羥基多酚羥基少羥基多 黃酮類型：黃酮類型：異黃酮二氫黃酮醇黃酮黃酮醇異黃酮二氫黃酮醇黃酮黃酮醇 芳香程度：芳香程度：芳香程度高，共軛雙鍵多吸附力芳香程度高，共軛雙鍵多吸附力 芳香程度高，共軛雙鍵少芳香程度高，共軛雙鍵少 二氫黃酮查耳酮二氫黃酮查耳酮 溶劑影響：溶劑影響：聚酰胺的聚酰胺的雙重色譜性雙重色譜性以以含水含水移動相（如甲醇一水）作洗移動相（如甲醇一水）作洗脫劑，脫劑，苷苷比比苷元苷元先洗下來。

17、先洗下來。以有機(jī)溶劑有機(jī)溶劑作洗脫劑作洗脫劑（如氯仿一甲醇）（如氯仿一甲醇）苷元苷元比比苷苷先洗脫下來。先洗脫下來。極性移動相（極性移動相（含水含水 溶劑系統(tǒng)）洗脫時溶劑系統(tǒng)）洗脫時有有機(jī)機(jī)溶溶劑劑（如如氯氯仿仿一甲醇）洗脫時一甲醇）洗脫時聚酰胺聚酰胺非極性非極性固定相固定相極性極性固定相固定相色譜行為色譜行為類似類似反相分配色譜反相分配色譜正相分配色譜正相分配色譜苷極性苷元苷極性苷元苷元極性苷苷元極性苷苷苷先洗脫先洗脫苷元苷元易洗脫易洗脫3 3葡聚糖凝膠柱色譜葡聚糖凝膠柱色譜 分離黃酮類化合物的機(jī)理：分離黃酮類化合物的機(jī)理：雙重性雙重性分離黃酮苷元分離黃酮苷元靠吸附作用靠吸附作用羥基少，極性

18、小，吸附力弱，先被洗脫。羥基少，極性小，吸附力弱，先被洗脫。分離黃酮苷時分離黃酮苷時分子篩性質(zhì)起主導(dǎo)作用分子篩性質(zhì)起主導(dǎo)作用糖數(shù)量多，分子量大，分子篩時，先洗脫糖數(shù)量多，分子量大，分子篩時，先洗脫下來。下來。（二）梯度（二）梯度pH萃取法萃取法酸性不同的酸性不同的黃酮苷元黃酮苷元的分離的分離酸性：酸性：7,4-OH7-或或 4-OH一般一般Ar-OH5-OH5%NaHCO3 35%Na2 2CO2 20.2%NaOH4%NaOH溶解溶解的堿水的堿水（三）根據(jù)分子中某些特定官能團(tuán)進(jìn)（三）根據(jù)分子中某些特定官能團(tuán)進(jìn)行分離行分離1.H3 3BO3 3絡(luò)合反應(yīng)（鄰二酚羥基）絡(luò)合反應(yīng)（鄰二酚羥基）2.P

19、b(Ac)2 2沉淀反應(yīng)（鄰二酚羥基）沉淀反應(yīng)（鄰二酚羥基）3.堿性醋酸鉛（不具鄰二酚羥基黃酮）堿性醋酸鉛（不具鄰二酚羥基黃酮）注意脫鉛注意脫鉛第四節(jié)第四節(jié) 黃酮類化合物的檢識與結(jié)構(gòu)測定黃酮類化合物的檢識與結(jié)構(gòu)測定測定一般步驟：測定一般步驟：（1）化學(xué)反應(yīng)化學(xué)反應(yīng)（2）PC、TLC（3）UV光譜光譜（4）1H-NMR（5）MS（6）13C-NMR一一 化學(xué)反應(yīng)化學(xué)反應(yīng)確定化合物的類別確定化合物的類別 二、色譜法在黃酮類鑒定中的應(yīng)用二、色譜法在黃酮類鑒定中的應(yīng)用確定黃酮的種類與數(shù)量確定黃酮的種類與數(shù)量（一）紙色譜（一）紙色譜（PPC）分離黃酮類化合物及其苷的混合物分離黃酮類化合物及其苷的混合物

20、1原理原理 分配色譜分配色譜 2溶劑選擇溶劑選擇：黃酮苷元黃酮苷元酸性酸性醇醇溶劑溶劑花色苷元花色苷元酸性酸性水溶劑水溶劑 HCl或或HOAc苷類苷類雙向雙向展開展開第一向展開劑：采用第一向展開劑：采用醇性醇性溶劑溶劑第二向展開劑：采用水或水溶液第二向展開劑：采用水或水溶液如：如：n-BuOH-HOAc-H2O(4:1:5上層）上層）如：如：2%6%HOAc等等 3在不同展開劑中，苷、苷元的在不同展開劑中，苷、苷元的Rf值不同值不同醇性醇性溶劑：溶劑：Rf 苷元苷元 單糖苷單糖苷 雙糖苷雙糖苷 水溶劑水溶劑：Rf 三糖苷三糖苷 雙糖苷雙糖苷苷元苷元(二二)硅膠薄層色譜：硅膠薄層色譜：(不用不用

21、Al2O3）分離與鑒定分離與鑒定弱極性弱極性黃酮類黃酮類（三）聚酰胺薄層色譜（三）聚酰胺薄層色譜分離含游離分離含游離酚羥基酚羥基的黃酮及其苷類的黃酮及其苷類三、紫外及可見光譜在黃酮類鑒定中三、紫外及可見光譜在黃酮類鑒定中的應(yīng)用的應(yīng)用紫外及可見光譜一般程序紫外及可見光譜一般程序：1測定樣品在測定樣品在甲醇甲醇中的中的UV光譜光譜2測定測定甲醇甲醇+診斷試劑后診斷試劑后的的UV光譜光譜3苷類苷類水解，或甲基化后水解，或甲基化后水解水解 測苷元或衍生物的測苷元或衍生物的UV光譜光譜 （一）黃酮類化合物在甲醇溶液中（一）黃酮類化合物在甲醇溶液中的的UV光譜特征光譜特征 1兩個譜帶兩個譜帶、與結(jié)構(gòu)的關(guān)系

22、與結(jié)構(gòu)的關(guān)系 苯甲?；郊柞；?峰帶峰帶（220280nm）桂皮?；鹌；?峰帶峰帶（300400nm）2各種類型黃酮的各種類型黃酮的UV光譜特點光譜特點（1）黃酮及黃酮醇類）黃酮及黃酮醇類 黃酮黃酮 黃酮黃酮 3-OR黃酮醇黃酮醇 帶帶(nm)(nm)帶帶(nm)(nm)220-280304-350328-357352-385木犀草素木犀草素(黃酮類黃酮類)槲皮素槲皮素(黃酮醇類黃酮醇類)（A）黃酮及黃酮醇類）黃酮及黃酮醇類UV光譜（甲醇）光譜（甲醇）(二)加入診斷試劑后引起的位移及其加入診斷試劑后引起的位移及其在結(jié)構(gòu)測定中的意義在結(jié)構(gòu)測定中的意義診斷試劑：診斷試劑：因黃酮中具有酚羥基、羰

23、基，加因黃酮中具有酚羥基、羰基，加入某些試劑，使其化學(xué)結(jié)構(gòu)變化，吸入某些試劑，使其化學(xué)結(jié)構(gòu)變化，吸收峰位改變，這些試劑稱為收峰位改變，這些試劑稱為診斷試劑診斷試劑。測定順序測定順序1樣品樣品/CH3OH測定黃酮類型測定黃酮類型2加診斷試劑加診斷試劑CH3OH+NaOCH3確定確定4-OH，3-OHCH3OH+NaOAC確定確定7-OHt t,對堿敏感的結(jié)構(gòu)對堿敏感的結(jié)構(gòu) CH3OH+NaOAC+H3BO3鄰二鄰二OHAlCl3/HCl與與CH3OHC3-OH、C5-OHAlCl3-AlCl3/HCl鄰二鄰二OH3苷類苷類水解后測定苷元的水解后測定苷元的UV光譜，與苷比較光譜，與苷比較四、氫核磁

24、共振在黃酮類結(jié)構(gòu)分析四、氫核磁共振在黃酮類結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用中的應(yīng)用（一）測試溶劑的選擇及樣品處理（一）測試溶劑的選擇及樣品處理1.氘代氯仿氘代氯仿 適合適合苷元、苷苷元、苷OCH32.氘代二甲基亞砜氘代二甲基亞砜（DMSO-d6）苷苷3.四氯化碳四氯化碳三甲基硅醚化的三甲基硅醚化的苷，苷元苷，苷元Ar-OH吡啶吡啶無水甲醇無水甲醇苷元中苷元中使苷，苷元使苷，苷元 極性小極性小 溶于溶于CCl4優(yōu)點：優(yōu)點：可溶于可溶于CCl4中，中，bp低低無干擾信號無干擾信號測試后用甲醇水解，回收樣品等測試后用甲醇水解，回收樣品等（二）影響黃酮類化合物氫質(zhì)子化學(xué)（二）影響黃酮類化合物氫質(zhì)子化學(xué) 位移的因素位移

25、的因素例：例：芹菜中的芹菜素芹菜中的芹菜素芹菜素芹菜素1.電效應(yīng)電效應(yīng)（1）誘導(dǎo)效應(yīng)）誘導(dǎo)效應(yīng)（C=O)A環(huán)環(huán)C5,C7 B環(huán)環(huán) 2,6,4+A環(huán)環(huán)C6,C8 B環(huán)環(huán) 3,5-B環(huán)環(huán) H2,6 H3,5（2）共軛效應(yīng)）共軛效應(yīng)-OH的影響的影響B(tài)環(huán) H2,6 H3,5A環(huán)環(huán) H8 H6上述誘導(dǎo)效應(yīng)與上述誘導(dǎo)效應(yīng)與共軛效應(yīng)結(jié)果使得：共軛效應(yīng)結(jié)果使得：H2,6 H3,5H8 H6B環(huán)：苯丙酰系統(tǒng)，環(huán)：苯丙酰系統(tǒng)，誘導(dǎo)效應(yīng)誘導(dǎo)效應(yīng) 起主導(dǎo)作用起主導(dǎo)作用A環(huán)：苯甲酰系統(tǒng)，環(huán)：苯甲酰系統(tǒng)，共軛效應(yīng)共軛效應(yīng)起主導(dǎo)作用起主導(dǎo)作用苯甲酰與苯丙酰共軛體系的比較苯甲酰與苯丙酰共軛體系的比較B環(huán)環(huán)HA環(huán)環(huán)H2.磁效

26、應(yīng)磁效應(yīng) C3H,C5H:受C=O的負(fù)屏蔽效應(yīng)影響的負(fù)屏蔽效應(yīng)影響C3H：磁效應(yīng)與電效應(yīng)不一致磁效應(yīng)與電效應(yīng)不一致C5H：磁效應(yīng)與電效應(yīng)一致磁效應(yīng)與電效應(yīng)一致 H5 H3（三）黃酮類化合物（三）黃酮類化合物H的的和和J值規(guī)律值規(guī)律1A環(huán)質(zhì)子環(huán)質(zhì)子（1）5，7-二羥基取代二羥基取代H-8 6.306.50（1H d J=2.5Hz）H-6 6.006.20（1H d J=2.5Hz）（2）7-羥基取代羥基取代H-5 7.908.20 （1H d J=9.0Hz）H-6 6.707.10 （1H dd J=2.5Hz J=9.0Hz）H-8 6.707.00 （1H d J=2.5Hz）B環(huán)質(zhì)子環(huán)

27、質(zhì)子（1）4-O O-R R取代取代H-2，H-6 7.708.10 （2H d J=8.5Hz）H-3，H-5 6.507.10 （2H d J=8.5Hz）（2）3，4-O-R-O-R取代取代H-5 6.707.10 （1 1H d J=8.5Hz）H-2 7.207.90 （1 1H d J=2.5Hz）H-6 7.207.90 （1 1H dd J=2.5Hz J=8.5Hz）C環(huán)質(zhì)子環(huán)質(zhì)子黃酮類黃酮類 H-3 6.30（s）（四）糖上的質(zhì)子（四）糖上的質(zhì)子H-1 4.006.00（d）-D-glcH1H2 60o J H1H2=23Hz-D-glc-D-glc H1H2 180o J

28、 H1H2=8Hz5-OCH3上的質(zhì)子上的質(zhì)子 3.504.10 6-COCH3上的質(zhì)子上的質(zhì)子脂肪族脂肪族 l.652.10芳香族芳香族 2.302.50 H-2”H-6”4.006.00（m）四、質(zhì)譜在黃酮類結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用四、質(zhì)譜在黃酮類結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用多數(shù)苷元：多數(shù)苷元：峰較強(qiáng)，為基峰，無須作成衍生物峰較強(qiáng)，為基峰，無須作成衍生物EI-MS中中多數(shù)苷：多數(shù)苷：極性強(qiáng)，難氣化，多作成甲基化或極性強(qiáng)，難氣化，多作成甲基化或三甲三甲基硅醚化衍生物，而獲得基硅醚化衍生物，而獲得 或不作成衍生物，也可用或不作成衍生物，也可用FD-MSFD-MS，F(xiàn)AB-MSFAB-MS等質(zhì)譜技術(shù)，獲得非常強(qiáng)的等質(zhì)譜技術(shù)，獲得非常強(qiáng)的黃酮類化合物苷元的黃酮類化合物苷元的EI-MS2個裂解途徑：個裂解途徑：途徑途徑-+222120102途徑途徑-222+105偶數(shù)質(zhì)量，偶數(shù)質(zhì)量，偶數(shù)電子偶數(shù)電子781.黃酮類基本裂解途徑黃酮類基本裂解途徑分子離子峰分子離子峰很很強(qiáng)強(qiáng)M+MM2828+途徑途徑-（RDA裂解）中裂解）中A、B+較強(qiáng)較強(qiáng)黃黃酮酮類類基基本本裂裂解解途途徑徑