《動物的克隆(浙科版)省名師優(yōu)質(zhì)課賽課獲獎?wù)n件市賽課百校聯(lián)賽優(yōu)質(zhì)課一等獎?wù)n件.ppt》由會員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《動物的克隆(浙科版)省名師優(yōu)質(zhì)課賽課獲獎?wù)n件市賽課百校聯(lián)賽優(yōu)質(zhì)課一等獎?wù)n件.ppt（21頁珍藏版）》請?jiān)趨R文網(wǎng)上搜索。

1、第三節(jié)第三節(jié) 動物的克隆動物的克隆1/21思索：思索：離體植物細(xì)胞和組織能夠經(jīng)過組織培離體植物細(xì)胞和組織能夠經(jīng)過組織培養(yǎng)技術(shù)克隆成完整植株，那么動物細(xì)胞和組織養(yǎng)技術(shù)克隆成完整植株，那么動物細(xì)胞和組織能否也進(jìn)行一樣克??？能否也進(jìn)行一樣克隆？不能，動物細(xì)胞全能性受到限制，到現(xiàn)在不能，動物細(xì)胞全能性受到限制，到現(xiàn)在為止將離體動物細(xì)胞直接克隆成個體還很困難，為止將離體動物細(xì)胞直接克隆成個體還很困難，所以所以動物細(xì)胞和組織不能進(jìn)行動物細(xì)胞和組織不能進(jìn)行與植物一樣與植物一樣個體個體克隆克隆。2/21動物細(xì)胞的培養(yǎng)和動物細(xì)胞的培養(yǎng)和克隆形成克隆形成3/21機(jī)械消化或者胰酶消化機(jī)械消化或者胰酶消化一、動物細(xì)胞

2、、組織培養(yǎng)一、動物細(xì)胞、組織培養(yǎng)1、什么方法取得離體單個動物細(xì)胞？、什么方法取得離體單個動物細(xì)胞？2、離體動物細(xì)胞能否正常生活、表現(xiàn)出正常生、離體動物細(xì)胞能否正常生活、表現(xiàn)出正常生命活動？命活動？能，在人工控制培養(yǎng)條件下，生長、分裂乃至接能，在人工控制培養(yǎng)條件下，生長、分裂乃至接觸抑制和衰老、死亡等，并展現(xiàn)一定組織特征。觸抑制和衰老、死亡等，并展現(xiàn)一定組織特征。3、是不是全部動物細(xì)胞都能在離體情況下表現(xiàn)出、是不是全部動物細(xì)胞都能在離體情況下表現(xiàn)出生命活動？生命活動？1、幼嫩細(xì)胞（如：、幼嫩細(xì)胞（如：動物胚胎或幼齡動物組織、器官動物胚胎或幼齡動物組織、器官）2、含全部營養(yǎng)物質(zhì)液體培養(yǎng)基和適宜環(huán)境

3、條件。、含全部營養(yǎng)物質(zhì)液體培養(yǎng)基和適宜環(huán)境條件。（胰蛋白酶）（胰蛋白酶）4/21動物細(xì)胞培養(yǎng)：動物細(xì)胞培養(yǎng)：體外培養(yǎng)分散后體外培養(yǎng)分散后體外培養(yǎng)分散后體外培養(yǎng)分散后單個細(xì)胞，單個細(xì)胞，單個細(xì)胞，單個細(xì)胞，使使使使其得以生存，并保持生命活動現(xiàn)象。其得以生存，并保持生命活動現(xiàn)象。其得以生存，并保持生命活動現(xiàn)象。其得以生存，并保持生命活動現(xiàn)象。像體內(nèi)一樣像體內(nèi)一樣像體內(nèi)一樣像體內(nèi)一樣展現(xiàn)一定組織特征。展現(xiàn)一定組織特征。展現(xiàn)一定組織特征。展現(xiàn)一定組織特征。動物組織培養(yǎng)：動物組織培養(yǎng)：體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)動物組織，動物組織，動物組織，動物組織，使其維持使其維持使其維持使其維持生活狀態(tài)或生長特

4、征。生活狀態(tài)或生長特征。生活狀態(tài)或生長特征。生活狀態(tài)或生長特征。能夠伴隨組織分化，但最能夠伴隨組織分化，但最能夠伴隨組織分化，但最能夠伴隨組織分化，但最終成為細(xì)胞培養(yǎng)。終成為細(xì)胞培養(yǎng)。終成為細(xì)胞培養(yǎng)。終成為細(xì)胞培養(yǎng)。動物器官培養(yǎng)：動物器官培養(yǎng)：體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)動物器官原基、部分動物器官原基、部分動物器官原基、部分動物器官原基、部分或整個器官，或整個器官，或整個器官，或整個器官，使之得以保留、生長。使之得以保留、生長。使之得以保留、生長。使之得以保留、生長。保持器官結(jié)保持器官結(jié)保持器官結(jié)保持器官結(jié)構(gòu)、功效及分化能力。構(gòu)、功效及分化能力。構(gòu)、功效及分化能力。構(gòu)、功效及分化能力。組組

5、織織培培養(yǎng)養(yǎng)5/216.19516.1951年，海拉細(xì)胞系建成。年，海拉細(xì)胞系建成。1.18851.1885年，雞神經(jīng)板在生理鹽水中培養(yǎng)成活。年，雞神經(jīng)板在生理鹽水中培養(yǎng)成活。2.19032.1903年，皮膚及白細(xì)胞在腹水及血清中存活一個月，年，皮膚及白細(xì)胞在腹水及血清中存活一個月，且觀察到細(xì)胞分裂。且觀察到細(xì)胞分裂。3.19073.1907年，蛙胚神經(jīng)管在蛙淋巴液中懸浮培養(yǎng)，成功年，蛙胚神經(jīng)管在蛙淋巴液中懸浮培養(yǎng)，成功看到神經(jīng)末端阿米巴運(yùn)動?？吹缴窠?jīng)末端阿米巴運(yùn)動。4.19124.1912年，雞胚浸出液對雞胚心臟組織塊進(jìn)行原代培養(yǎng)年，雞胚浸出液對雞胚心臟組織塊進(jìn)行原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)。和傳代培

6、養(yǎng)。5.19435.1943年，取得長久培養(yǎng)細(xì)胞系（可連續(xù)傳代）和細(xì)胞年，取得長久培養(yǎng)細(xì)胞系（可連續(xù)傳代）和細(xì)胞克隆?？寺??！敖M織培養(yǎng)組織培養(yǎng)”一詞產(chǎn)生一詞產(chǎn)生真正組織培養(yǎng)開始；真正組織培養(yǎng)開始；創(chuàng)建了懸浮培養(yǎng)法創(chuàng)建了懸浮培養(yǎng)法成功進(jìn)行了傳代培養(yǎng)；成功進(jìn)行了傳代培養(yǎng)；創(chuàng)造了卡氏瓶；創(chuàng)造了卡氏瓶；標(biāo)志著組織培養(yǎng)工作進(jìn)入標(biāo)志著組織培養(yǎng)工作進(jìn)入全新階段全新階段二、動物組織培養(yǎng)技術(shù)發(fā)展二、動物組織培養(yǎng)技術(shù)發(fā)展6/212 2、適宜環(huán)境條件、適宜環(huán)境條件無菌、無毒環(huán)境：無菌、無毒環(huán)境：加抗生素，定時更換培養(yǎng)液加抗生素，定時更換培養(yǎng)液適宜溫度和適宜溫度和pHpH值：值：溫度：溫度：36.50.5 36.50

7、.5 pHpH值：值：7.2-7.47.2-7.4適宜氣體環(huán)境：適宜氣體環(huán)境：O O2 2和和COCO2 2（95%95%空氣和空氣和5%CO5%CO2 2）適宜滲透壓等適宜滲透壓等（一）培養(yǎng)條件（一）培養(yǎng)條件 三、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程三、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程成份：成份：無機(jī)鹽、葡萄糖、氨基酸、維生素和動物血清等無機(jī)鹽、葡萄糖、氨基酸、維生素和動物血清等1、含全部營養(yǎng)物質(zhì)培養(yǎng)液、含全部營養(yǎng)物質(zhì)培養(yǎng)液7/21從動物從動物胚胎或幼齡動物組織胚胎或幼齡動物組織切片中取小片樣品切片中取小片樣品轉(zhuǎn)入特殊培養(yǎng)液轉(zhuǎn)入特殊培養(yǎng)液原代培養(yǎng)原代培養(yǎng)分裝到多個卡氏瓶中分裝到多個卡氏瓶中傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)單個單個細(xì)胞懸浮液細(xì)胞

8、懸浮液CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)箱中保溫培養(yǎng)保溫培養(yǎng)細(xì)胞系細(xì)胞系機(jī)械消化或胰酶消化機(jī)械消化或胰酶消化（胰蛋白酶）（胰蛋白酶）（二）培養(yǎng)過程（二）培養(yǎng)過程 原代培養(yǎng)物原代培養(yǎng)物選擇或純化選擇或純化選擇或純化選擇或純化細(xì)胞株細(xì)胞株細(xì)胞株細(xì)胞株8/21怎樣界定原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)？為何要傳代培養(yǎng)？怎樣界定原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)？為何要傳代培養(yǎng)？細(xì)胞懸細(xì)胞懸浮液浮液轉(zhuǎn)入特殊培養(yǎng)液轉(zhuǎn)入特殊培養(yǎng)液首次培養(yǎng)首次培養(yǎng)換瓶后培養(yǎng)換瓶后培養(yǎng)原代培養(yǎng)原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)為何？為何？9/21原代培養(yǎng)原代培養(yǎng)傳傳代代培培養(yǎng)養(yǎng)原代培養(yǎng)物原代培養(yǎng)物細(xì)胞系：細(xì)胞系：可連續(xù)傳代細(xì)胞可連續(xù)傳代細(xì)胞 原代培養(yǎng)物在首次傳代時就原代培養(yǎng)物在首次

9、傳代時就成為細(xì)胞系。成為細(xì)胞系。能連續(xù)能連續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng) 連續(xù)細(xì)胞系連續(xù)細(xì)胞系不能連續(xù)不能連續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng) 有限細(xì)胞系有限細(xì)胞系四、細(xì)胞系、細(xì)胞株四、細(xì)胞系、細(xì)胞株 （二倍體細(xì)胞）（二倍體細(xì)胞）（異倍體核型細(xì)胞）（異倍體核型細(xì)胞）（1 1）惡性細(xì)胞系，異體致瘤性）惡性細(xì)胞系，異體致瘤性）惡性細(xì)胞系，異體致瘤性）惡性細(xì)胞系，異體致瘤性 （2 2）保留接觸抑制，不致癌）保留接觸抑制，不致癌）保留接觸抑制，不致癌）保留接觸抑制，不致癌10/212、細(xì)胞株：、細(xì)胞株：經(jīng)過一定經(jīng)過一定經(jīng)過一定經(jīng)過一定選擇或純化選擇或純化選擇或純化選擇或純化方法，從方法，從方法，從方法，從原代培養(yǎng)物或細(xì)原代培養(yǎng)物或細(xì)原代培養(yǎng)物或

10、細(xì)原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系胞系胞系胞系中取得中取得中取得中取得含有特殊性質(zhì)含有特殊性質(zhì)含有特殊性質(zhì)含有特殊性質(zhì)細(xì)胞系。細(xì)胞系。細(xì)胞系。細(xì)胞系。如：單抗細(xì)胞株如：單抗細(xì)胞株如：單抗細(xì)胞株如：單抗細(xì)胞株 細(xì)胞株普通含有恒定染色體組型、同工酶類型、細(xì)胞株普通含有恒定染色體組型、同工酶類型、病毒敏感性和生化特征等。病毒敏感性和生化特征等。遺傳物質(zhì)未改變。遺傳物質(zhì)未改變。連續(xù)細(xì)胞株：可連續(xù)連續(xù)細(xì)胞株：可連續(xù)屢次傳代屢次傳代細(xì)胞株。細(xì)胞株。有限細(xì)胞株：傳代有限細(xì)胞株：傳代次數(shù)有限次數(shù)有限細(xì)胞株細(xì)胞株細(xì)胞系：細(xì)胞系：泛指可傳代細(xì)胞。泛指可傳代細(xì)胞。細(xì)胞株細(xì)胞株:含有特殊性質(zhì)細(xì)胞系。含有特殊性質(zhì)細(xì)胞系。11/21五

11、、克隆培養(yǎng)法（細(xì)胞克?。┪?、克隆培養(yǎng)法（細(xì)胞克?。?、概念：、概念：把一個把一個單細(xì)胞單細(xì)胞從群體中分離出來單獨(dú)培養(yǎng)，從群體中分離出來單獨(dú)培養(yǎng)，使之繁衍成一個使之繁衍成一個新細(xì)胞群體新細(xì)胞群體技術(shù)。技術(shù)。2、特點(diǎn)：、特點(diǎn)：遺傳性狀均一、表現(xiàn)性狀相同，便于研究遺傳性狀均一、表現(xiàn)性狀相同，便于研究異質(zhì)性異質(zhì)性細(xì)胞系細(xì)胞系克隆培養(yǎng)克隆培養(yǎng)純系（克?。┘兿担寺。?、最基本要求、最基本要求:確保所建成克隆確保所建成克隆起源于單個細(xì)胞起源于單個細(xì)胞12/214、適合于克隆細(xì)胞：、適合于克隆細(xì)胞：對環(huán)境有較大適應(yīng)范圍對環(huán)境有較大適應(yīng)范圍和含有和含有較強(qiáng)獨(dú)立生存能力較強(qiáng)獨(dú)立生存能力細(xì)胞細(xì)胞5、提升細(xì)胞克隆形

12、成率辦法：、提升細(xì)胞克隆形成率辦法：選擇適宜培養(yǎng)基選擇適宜培養(yǎng)基添加血清添加血清 （胎牛血清胎牛血清）(能促進(jìn)細(xì)胞生長、增殖和貼附能促進(jìn)細(xì)胞生長、增殖和貼附)以滋養(yǎng)細(xì)胞支持生長（以滋養(yǎng)細(xì)胞支持生長（經(jīng)射線照射小鼠成纖維細(xì)胞經(jīng)射線照射小鼠成纖維細(xì)胞）激素刺激（激素刺激（胰島素胰島素等等）使用使用COCO2 2培養(yǎng)箱，調(diào)整培養(yǎng)箱，調(diào)整PHPH 群體細(xì)胞群體細(xì)胞 單細(xì)胞單細(xì)胞無限細(xì)胞系、轉(zhuǎn)化或腫瘤細(xì)胞無限細(xì)胞系、轉(zhuǎn)化或腫瘤細(xì)胞 原代細(xì)胞、有限細(xì)胞系原代細(xì)胞、有限細(xì)胞系6、細(xì)胞克隆主要用途：、細(xì)胞克隆主要用途：從普通細(xì)胞系中從普通細(xì)胞系中分離分離出缺乏特殊基因出缺乏特殊基因突變細(xì)胞系突變細(xì)胞系。用于研

13、究細(xì)胞遺傳規(guī)律和生理特征。用于研究細(xì)胞遺傳規(guī)律和生理特征。13/21離體動物細(xì)胞生長特征：離體動物細(xì)胞生長特征：（1）貼壁生長：貼壁生長：懸浮液中分散細(xì)胞緊貼培養(yǎng)瓶內(nèi)壁才能生長。懸浮液中分散細(xì)胞緊貼培養(yǎng)瓶內(nèi)壁才能生長。（2 2）接觸抑制：）接觸抑制：當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時，細(xì)胞就當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時，細(xì)胞就會停頓分裂。會停頓分裂。（3 3）正常生命活動：）正常生命活動：生長、分裂、有規(guī)律衰老、死亡等現(xiàn)象，生長、分裂、有規(guī)律衰老、死亡等現(xiàn)象，但不分但不分化?；?4/21細(xì)胞貼壁過程細(xì)胞貼壁過程15/21 細(xì)胞在細(xì)胞在貼壁生長貼壁生長過過程中程中,伴隨細(xì)胞分裂伴隨細(xì)胞分

14、裂,數(shù)數(shù)量不停增加量不停增加,最終最終形成形成一個單層一個單層,此時細(xì)胞間此時細(xì)胞間相互接觸相互接觸,細(xì)胞分裂和細(xì)胞分裂和生長停頓生長停頓。接觸抑制接觸抑制16/211 1、用于動物細(xì)胞培養(yǎng)組織和細(xì)胞大都取自胚胎或、用于動物細(xì)胞培養(yǎng)組織和細(xì)胞大都取自胚胎或出生很快幼齡動物器官或組織，其主要原因是這么出生很快幼齡動物器官或組織，其主要原因是這么組織細(xì)胞組織細(xì)胞 （）A A、輕易產(chǎn)生各種變異、輕易產(chǎn)生各種變異 B B、含有更強(qiáng)全能性、含有更強(qiáng)全能性 C C、取材十分方便、取材十分方便 D D、分裂增殖能力強(qiáng)、分裂增殖能力強(qiáng)D D17/212 2、用動、植物成體體細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng)，以下敘述正用動、植

15、物成體體細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng)，以下敘述正確是確是A A都需用都需用COCO2 2培養(yǎng)箱培養(yǎng)箱 B B都須用液體培養(yǎng)基都須用液體培養(yǎng)基 C C都要在無菌條件下進(jìn)行都要在無菌條件下進(jìn)行 D D都可表達(dá)細(xì)胞全能性都可表達(dá)細(xì)胞全能性3 3、動物細(xì)胞克隆是指動物細(xì)胞克隆是指 A A一個單細(xì)胞培養(yǎng)成一個新細(xì)胞群技術(shù)一個單細(xì)胞培養(yǎng)成一個新細(xì)胞群技術(shù) B B一個重組細(xì)胞經(jīng)分裂、分化發(fā)育成一個動物個體技一個重組細(xì)胞經(jīng)分裂、分化發(fā)育成一個動物個體技術(shù)術(shù) C C幾個同種動物細(xì)胞培養(yǎng)成一個新細(xì)胞群技術(shù)幾個同種動物細(xì)胞培養(yǎng)成一個新細(xì)胞群技術(shù) D D一個卵裂球經(jīng)胚胎分割發(fā)育成四個細(xì)胞群技術(shù)一個卵裂球經(jīng)胚胎分割發(fā)育成四個細(xì)胞群

16、技術(shù)CA19/214 4、某研究小組為測定藥品對體外培養(yǎng)細(xì)胞毒性，準(zhǔn)某研究小組為測定藥品對體外培養(yǎng)細(xì)胞毒性，準(zhǔn)備對某種動物肝腫瘤細(xì)胞備對某種動物肝腫瘤細(xì)胞(甲甲)和正常肝細(xì)胞和正常肝細(xì)胞(乙乙)進(jìn)行進(jìn)行動物細(xì)胞培養(yǎng)。以下說法正確是動物細(xì)胞培養(yǎng)。以下說法正確是 ()A.A.在利用兩種肝組織塊制備肝細(xì)胞懸液時，也可用在利用兩種肝組織塊制備肝細(xì)胞懸液時，也可用胃蛋白酶處理胃蛋白酶處理B.B.細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO5%CO2 2恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，COCO2 2作用作用是刺激細(xì)胞呼吸是刺激細(xì)胞呼吸C.C.甲、乙細(xì)胞在連續(xù)原代培養(yǎng)過程中，乙會出現(xiàn)停甲、乙細(xì)胞在連續(xù)原代培養(yǎng)過程中，乙會出現(xiàn)停頓增殖現(xiàn)象頓增殖現(xiàn)象D.D.僅用該培養(yǎng)液也能用來培養(yǎng)乙肝病毒僅用該培養(yǎng)液也能用來培養(yǎng)乙肝病毒C20/215.5.以下關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)敘述，正確是以下關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)敘述，正確是()A.A.培養(yǎng)中人效應(yīng)培養(yǎng)中人效應(yīng)T T細(xì)胞能產(chǎn)生單克隆抗體細(xì)胞能產(chǎn)生單克隆抗體B.B.培養(yǎng)中人培養(yǎng)中人B B細(xì)胞能夠無限地增殖細(xì)胞能夠無限地增殖C.C.人成熟紅細(xì)胞經(jīng)過培養(yǎng)能形成細(xì)胞株人成熟紅細(xì)胞經(jīng)過培養(yǎng)能形成細(xì)胞株D.D.用胰蛋白酶處理肝組織可取得單個肝細(xì)胞用胰蛋白酶處理肝組織可取得單個肝細(xì)胞D21/21